[發明專利]一種過表達HS3ST5基因的試劑在促進病毒感染中的應用及重組CHO-K1細胞系在審
| 申請號： | 202211248062.5 | 申請日： | 2022-10-12 |
| 公開（公告）號： | CN116144707A | 公開（公告）日： | 2023-05-23 |
| 發明（設計）人： | 白興文;盧曾軍;袁紅;黃磊;宮曉華;劉在新;包慧芳;李平花;孫普;李冬;馬雪青;陳應理;曹軼梅;付元芳;張婧;鄧欣雨;焦云娟;王利豪;楊宇軒 | 申請（專利權）人： | 中國農業科學院蘭州獸醫研究所 |
| 主分類號： | C12N15/867 | 分類號： | C12N15/867;C12N15/54;C12N5/10;C12N7/00;C12R1/93 |
| 代理公司： | 北京高沃律師事務所 11569 | 代理人： | 薛紅凡 |
| 地址： | 730070 *** | 國省代碼： | 甘肅;62 |
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| 摘要： | |||
| 搜索關鍵詞： | 一種 表達 hs3st5 基因 試劑 促進 病毒感染 中的 應用 重組 cho k1 細胞系 | ||
1.一種過表達HS3ST5基因的試劑在促進病毒感染中的應用。
2.根據權利要求1所述應用，其特征在于，所述HS3ST5基因的核苷酸序列如SEQ?ID?NO:1所示。
3.根據權利要求1所述應用，其特征在于，所述過表達HS3ST5基因的試劑包括過表達HS3ST5基因的重組載體。
4.根據權利要求1所述應用，其特征在于，所述提高病毒感染性包括促進病毒吸附和入侵宿主細胞的能力、提高病毒基因復制和子代病毒復制水平。
5.根據權利要求1～4任意一項所述應用，其特征在于，所述病毒包括利用HS受體入侵細胞的病毒。
6.根據權利要求5所述應用，其特征在于，所述利用HS受體入侵細胞的病毒包括口蹄疫病毒、嚴重急性呼吸綜合征冠狀病毒和單純皰疹病毒中的一種或幾種。
7.一種穩定表達HS3ST5的重組CHO-K1細胞系，其特征在于，所述重組CHO-K1細胞系過表達HS3ST5蛋白。
8.權利要求7所述穩定表達HS3ST5的重組CHO-K1細胞系的構建方法，其特征在于，包括以下步驟：
1)構建過表達HS3ST5基因的重組慢病毒質粒；
2)將步驟1)中所述過表達HS3ST5基因的重組慢病毒質粒和輔助質粒共同轉染細胞拯救得到過表達HS3ST5重組慢病毒；
3)將拯救得到的重組慢病毒感染CHO-K1細胞，經篩選得到穩定表達HS3ST5的重組CHO-K1細胞系。
9.根據權利要求8所述構建方法，其特征在于，步驟1)中所述構建方法，用含Xba?I和Not?I酶切位點的引物擴增HS3ST5基因，得到的擴增片段和慢病毒載體pLOV-CMV-EGFP分別經Xba?I和Not?I雙酶切，酶切片段和線性化載體連接，鑒定，得到過表達HS3ST5基因的重組慢病毒質粒。
10.權利要求7所述穩定表達HS3ST5的重組CHO-K1細胞系或權利要求8或9所述構建方法得到的穩定表達HS3ST5的重組CHO-K1細胞系在制備病毒感染細胞模型中的應用。
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