[發明專利]一種基于環介導等溫擴增技術快速檢測布拉氏酵母的核酸檢測引物組及可視化檢測方法

在審

• 申請號: 202211246915.1
• 申請日: 2022-10-12
• 公開（公告）號: CN115961071A
• 公開（公告）日: 2023-04-14
• 發明（設計）人: 梁蔚陽;楊佳寧;黃瑤;劉昂;李杉;張雷;蔣玉輝
• 申請（專利權）人: 廣東省藥品檢驗所（廣東省藥品質量研究所;廣東省口岸藥品檢驗所）
• 主分類號: C12Q1/6895
• 分類號: C12Q1/6895;C12Q1/6844;C12N15/11;C12R1/85;C12R1/865
• 代理公司: 廣州嘉權專利商標事務所有限公司 44205
• 代理人: 林德強

1.一種用于檢測酵母菌的試劑，包括LAMP引物組1和/或LAMP引物組2；

所述LAMP引物組1和LAMP引物組2分別包括一對外引物、一對內引物和一對環引物；

所述LAMP引物組1包括引物組ITS-1～ITS-3中至少一種；

所述引物組ITS-1的序列分別如下：

外引物：ITS-F3-1的序列如SEQ?ID?NO:1所示，ITS-B3-1的序列如SEQ?ID?NO:2所示；

內引物：ITS-FIP-1的序列如SEQ?ID?NO:3所示，ITS-BIP-1的序列如SEQ?ID?NO:4所示；

環引物：ITS-LF-1的序列如SEQ?ID?NO:5所示，環引物ITS-LB-1的序列如SEQ?ID?NO:6所示；

所述引物組ITS-2的序列分別如下：

外引物：ITS-F3-2的序列如SEQ?ID?NO:7所示，ITS-B3-2的序列如SEQ?ID?NO:8所示；

內引物：ITS-FIP-2的序列如SEQ?ID?NO:9所示，ITS-BIP-2的序列如SEQ?ID?NO:10所示；

環引物：ITS-LF-2的序列如SEQ?ID?NO:11所示，ITS-LB-2的序列如SEQ?ID?NO:12所示；

所述引物組ITS-3的序列分別如下：

外引物：ITS-F3-3的序列如SEQ?ID?NO:13所示，ITS-B3-3的序列如SEQ?ID?NO:14所示；

內引物：ITS-FIP-3的序列如SEQ?ID?NO:15所示，ITS-BIP-3的序列如SEQ?ID?NO:16所示；

環引物：ITS-LF-3的序列如SEQ?ID?NO:17所示，ITS-LB-3的序列如SEQ?ID?NO:18所示；

所述LAMP引物組2包括引物組HXT9-1～HXT9-3中至少一種：

所述引物組HXT9-1的序列分別如下：

外引物：HXT9-F3-1的序列如SEQ?ID?NO:19所示，HXT9-B3-1的序列如SEQ?ID?NO:20所示；

內引物：HXT9-FIP-1的序列如SEQ?ID?NO:21所示，HXT9-BIP-1的序列如SEQ?ID?NO:22所示；

環引物：HXT9-LF-1的序列如SEQ?ID?NO:23所示，HXT9-LB-1的序列如SEQ?ID?NO:24所示；

所述引物組HXT9-2的序列分別如下：

外引物：HXT9-F3-2的序列如SEQ?ID?NO:25所示，HXT9-B3-2的序列如SEQ?ID?NO:26所示；

內引物：HXT9-FIP-2的序列如SEQ?ID?NO:27所示，HXT9-BIP-2的序列如SEQ?ID?NO:28所示；

環引物：HXT9-LF-2的序列如SEQ?ID?NO:29所示，HXT9-LB-2的序列如SEQ?ID?NO:30所示；

所述引物組HXT9-3的序列分別如下：

外引物：HXT9-F3-3的序列如SEQ?ID?NO:31所示，HXT9-B3-3的序列如SEQ?ID?NO:32所示；內引物：HXT9-FIP-3的序列如SEQ?ID?NO:33所示，HXT9-BIP-3的序列如SEQ?ID?NO:34所示；

環引物：HXT9-LF-3的序列如SEQ?ID?NO:35所示，HXT9-LB-3的序列如SEQ?ID?NO:36所示。

2.根據權利要求1所述的試劑，其特征在于，所述酵母包括布拉氏酵母菌和/或釀酒酵母。

3.權利要求1或2所述的試劑在制備試劑盒中的應用。

4.一種檢測酵母菌的試劑盒，包括權利要求1或2所述的試劑。

5.根據權利要求4所述的試劑盒，其特征在于，所述試劑盒還包括DNA聚合酶、擴增反應液、甜菜堿、硫酸鎂、dNTPs、HNB染料、陽性質控品和空白對照品中的至少一種。