[發明專利]一種奧拉帕利一水合物中3-溴苯酞的檢測方法

在審

• 申請號: 202211244886.5
• 申請日: 2022-10-12
• 公開（公告）號: CN115541763A
• 公開（公告）日: 2022-12-30
• 發明（設計）人: 黃榮;姜鑫;朱天強;劉子陽
• 申請（專利權）人: 鈦和（杭州）醫藥技術服務有限公司
• 主分類號: G01N30/02
• 分類號: G01N30/02;G01N30/72;G01N30/86
• 代理公司: 北京志霖恒遠知識產權代理有限公司 11435
• 代理人: 戴莉

本發明公開了一種奧拉帕利一水合物中3?溴苯酞的檢測方法，包括以下步驟：步驟S1：得到衍生溶劑，并將衍生溶劑溶解于甲醇中作為空白溶液；步驟S2：供試品溶液；步驟S3：對照品溶液；步驟S4：依次將空白溶液、供試品溶液、對照品溶液注入LC?MS系統，記錄對照品溶液主峰峰面積以及供試品溶液中與對照品溶液保留時間一致的峰面積，采用外標法計算供試品中的3?溴苯酞含量。本發明通過選取特定的衍生溶劑將供試品衍生化后，采用LC?MS/MS方法，在本發明開發的色譜和質譜條件下，實現奧拉帕利一水合物中遺傳毒性雜質3?溴苯酞的有效檢測，該方法的準確度、精密度、重現性、線性、溶液穩定性均符合要求。能降低遺傳毒性雜質對人體的危害，為安全用藥提供保障。

技術領域

本發明涉及一種藥物分析技術領域，尤其涉及一種奧拉帕利一水合物中3-溴苯酞的檢測方法。

背景技術

奧拉帕利（Olaparib）是英國阿斯利康公司和德國艾伯維公司合作生產一種口服多聚二磷酸腺苷核糖聚合酶（PARP）抑制劑，利用腫瘤DNA損傷反應（DDR）途徑的缺陷，優先殺死癌細胞。該藥于2014年12月在美國獲FDA批準，用于治療既往接受過兩次以上治療且攜帶種系BRCA突變的晚期卵巢癌患者，成為全球首個獲批的PARP抑制劑。隨后歐盟、日本等多地獲批，且適應癥不斷擴大，目前已經覆蓋乳腺癌、卵巢癌、輸卵管癌、腹膜癌和胰腺癌。2018年8月23日，國家藥品監督管理局正式批準卵巢癌靶向藥物奧拉帕利在中國上市，成為在我國國內上市的首款PARP抑制劑。奧拉帕利更是被納入我國2019醫保目錄。

目前國內外未見有對奧拉帕利中潛在基因毒性雜質3-溴苯酞分析方法的研究，因此，研發出一種能夠有效檢測出遺傳毒性雜質3-溴苯酞，且符合操作簡單、試劑易得、重現性、線性和回收率好，環境污染小的方法非常有意義。

遺傳毒性雜質的化學結構如下：

雜質名稱3-溴苯酞

化學結構式：

分子式C₈H₅BrO₂

分子量213.03

化學文摘號6940-49-4

目前，國內外文獻尚未見到奧拉帕利一水合物中遺傳毒性雜質3-溴苯酞檢測方法報道。

發明內容

本發明為了解決上述技術問題，提供一種奧拉帕利一水合物中3-溴苯酞的檢測方法。

本發明采用的技術方案如下：

一種奧拉帕利一水合物中3-溴苯酞的檢測方法，包括以下步驟：

步驟S1：將哌啶溶解于甲醇中進行稀釋、混合均勻，得到衍生溶劑，并將衍生溶劑溶解于甲醇中作為空白溶液；

步驟S2：將奧拉帕利一水合物溶于甲醇形成奧拉帕利溶液，并將衍生溶劑與奧拉帕利溶液按照體積比為1:10-1:200的比例進行均勻混合，作為供試品溶液；

步驟S3：將3-溴苯酞溶解于甲醇得到濃度為2.5ng/ml的3-溴苯酞溶液，并將衍生溶劑與3-溴苯酞溶液按照體積比為1:5-1:50的比例進行均勻混合，作為對照品溶液；

步驟S4：依次將空白溶液、供試品溶液、對照品溶液注入LC-MS系統，記錄對照品溶液主峰峰面積以及供試品溶液中與對照品溶液保留時間一致的峰面積，采用外標法計算供試品中的3-溴苯酞含量。

進一步地，所述步驟S1中衍生溶劑的哌啶的體積與甲醇的體積比為1:5-1:50。

進一步地，所述LC-MS系統所使用的色譜柱為反相C18柱，流動相由0.1%甲酸水溶液和甲醇組成。

進一步地，所述LC-MS系統中采用梯度洗脫，所述梯度洗脫的流速為0.3mL/min、柱溫為30℃、樣品盤溫度為4℃、狹縫寬為1.2nm。