[發(fā)明專利]一種奧拉帕利一水合物中3-溴苯酞的檢測(cè)方法

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• 申請(qǐng)?zhí)枺?/td>: 202211244886.5
• 申請(qǐng)日: 2022-10-12
• 公開(kāi)（公告）號(hào): CN115541763A
• 公開(kāi)（公告）日: 2022-12-30
• 發(fā)明（設(shè)計(jì)）人: 黃榮;姜鑫;朱天強(qiáng);劉子陽(yáng)
• 申請(qǐng)（專利權(quán)）人: 鈦和（杭州）醫(yī)藥技術(shù)服務(wù)有限公司
• 主分類號(hào): G01N30/02
• 分類號(hào): G01N30/02;G01N30/72;G01N30/86
• 代理公司: 北京志霖恒遠(yuǎn)知識(shí)產(chǎn)權(quán)代理有限公司 11435
• 代理人: 戴莉

本發(fā)明公開(kāi)了一種奧拉帕利一水合物中3?溴苯酞的檢測(cè)方法，包括以下步驟：步驟S1：得到衍生溶劑，并將衍生溶劑溶解于甲醇中作為空白溶液；步驟S2：供試品溶液；步驟S3：對(duì)照品溶液；步驟S4：依次將空白溶液、供試品溶液、對(duì)照品溶液注入LC?MS系統(tǒng)，記錄對(duì)照品溶液主峰峰面積以及供試品溶液中與對(duì)照品溶液保留時(shí)間一致的峰面積，采用外標(biāo)法計(jì)算供試品中的3?溴苯酞含量。本發(fā)明通過(guò)選取特定的衍生溶劑將供試品衍生化后，采用LC?MS/MS方法，在本發(fā)明開(kāi)發(fā)的色譜和質(zhì)譜條件下，實(shí)現(xiàn)奧拉帕利一水合物中遺傳毒性雜質(zhì)3?溴苯酞的有效檢測(cè)，該方法的準(zhǔn)確度、精密度、重現(xiàn)性、線性、溶液穩(wěn)定性均符合要求。能降低遺傳毒性雜質(zhì)對(duì)人體的危害，為安全用藥提供保障。

技術(shù)領(lǐng)域

本發(fā)明涉及一種藥物分析技術(shù)領(lǐng)域，尤其涉及一種奧拉帕利一水合物中3-溴苯酞的檢測(cè)方法。

背景技術(shù)

奧拉帕利（Olaparib）是英國(guó)阿斯利康公司和德國(guó)艾伯維公司合作生產(chǎn)一種口服多聚二磷酸腺苷核糖聚合酶（PARP）抑制劑，利用腫瘤DNA損傷反應(yīng)（DDR）途徑的缺陷，優(yōu)先殺死癌細(xì)胞。該藥于2014年12月在美國(guó)獲FDA批準(zhǔn)，用于治療既往接受過(guò)兩次以上治療且攜帶種系BRCA突變的晚期卵巢癌患者，成為全球首個(gè)獲批的PARP抑制劑。隨后歐盟、日本等多地獲批，且適應(yīng)癥不斷擴(kuò)大，目前已經(jīng)覆蓋乳腺癌、卵巢癌、輸卵管癌、腹膜癌和胰腺癌。2018年8月23日，國(guó)家藥品監(jiān)督管理局正式批準(zhǔn)卵巢癌靶向藥物奧拉帕利在中國(guó)上市，成為在我國(guó)國(guó)內(nèi)上市的首款PARP抑制劑。奧拉帕利更是被納入我國(guó)2019醫(yī)保目錄。

目前國(guó)內(nèi)外未見(jiàn)有對(duì)奧拉帕利中潛在基因毒性雜質(zhì)3-溴苯酞分析方法的研究，因此，研發(fā)出一種能夠有效檢測(cè)出遺傳毒性雜質(zhì)3-溴苯酞，且符合操作簡(jiǎn)單、試劑易得、重現(xiàn)性、線性和回收率好，環(huán)境污染小的方法非常有意義。

遺傳毒性雜質(zhì)的化學(xué)結(jié)構(gòu)如下：

雜質(zhì)名稱3-溴苯酞

化學(xué)結(jié)構(gòu)式：

分子式C₈H₅BrO₂

分子量213.03

化學(xué)文摘號(hào)6940-49-4

目前，國(guó)內(nèi)外文獻(xiàn)尚未見(jiàn)到奧拉帕利一水合物中遺傳毒性雜質(zhì)3-溴苯酞檢測(cè)方法報(bào)道。

發(fā)明內(nèi)容

本發(fā)明為了解決上述技術(shù)問(wèn)題，提供一種奧拉帕利一水合物中3-溴苯酞的檢測(cè)方法。

本發(fā)明采用的技術(shù)方案如下：

一種奧拉帕利一水合物中3-溴苯酞的檢測(cè)方法，包括以下步驟：

步驟S1：將哌啶溶解于甲醇中進(jìn)行稀釋、混合均勻，得到衍生溶劑，并將衍生溶劑溶解于甲醇中作為空白溶液；

步驟S2：將奧拉帕利一水合物溶于甲醇形成奧拉帕利溶液，并將衍生溶劑與奧拉帕利溶液按照體積比為1:10-1:200的比例進(jìn)行均勻混合，作為供試品溶液；

步驟S3：將3-溴苯酞溶解于甲醇得到濃度為2.5ng/ml的3-溴苯酞溶液，并將衍生溶劑與3-溴苯酞溶液按照體積比為1:5-1:50的比例進(jìn)行均勻混合，作為對(duì)照品溶液；

步驟S4：依次將空白溶液、供試品溶液、對(duì)照品溶液注入LC-MS系統(tǒng)，記錄對(duì)照品溶液主峰峰面積以及供試品溶液中與對(duì)照品溶液保留時(shí)間一致的峰面積，采用外標(biāo)法計(jì)算供試品中的3-溴苯酞含量。

進(jìn)一步地，所述步驟S1中衍生溶劑的哌啶的體積與甲醇的體積比為1:5-1:50。

進(jìn)一步地，所述LC-MS系統(tǒng)所使用的色譜柱為反相C18柱，流動(dòng)相由0.1%甲酸水溶液和甲醇組成。

進(jìn)一步地，所述LC-MS系統(tǒng)中采用梯度洗脫，所述梯度洗脫的流速為0.3mL/min、柱溫為30℃、樣品盤(pán)溫度為4℃、狹縫寬為1.2nm。