[發明專利]白花前胡不定芽的繁殖方法

有效

• 申請號: 202211222730.7
• 申請日: 2022-10-08
• 公開（公告）號: CN115380830B
• 公開（公告）日: 2023-08-01
• 發明（設計）人: 毛碧增;錢亦純;沙浩東
• 申請（專利權）人: 浙江大學
• 主分類號: A01H4/00
• 分類號: A01H4/00;A01G31/00
• 代理公司: 杭州中成專利事務所有限公司 33212
• 代理人: 金祺

1.白花前胡不定芽的繁殖方法，其特征在于依次包括以下步驟：

1)、外植體滅菌：

選擇長勢良好的白花前胡植株，首先流水清洗植株，然后切取植株莖尖作為外植體材料；

將外植體材料消毒后，用無菌濾紙吸干外植體材料表面水分，用無菌手術刀修整，從而將莖尖外層變色的組織切除，得莖尖外植體；

2)、無菌苗培養：

將步驟1)得到的莖尖外植體接種到擴繁培養基中，在植物組織培養室內于24±1℃培養，直至在外植體上誘導出長度≥0.5cm且個數≥5個的不定芽才結束培養；

擴繁培養基為：1L的MS+2.4～2.6mg?6-BA、20～30g白砂糖、4～9g瓊脂，pH?5.8±0.2；

3)、生根培養：

將步驟2)所得的白花前胡無菌苗上的每個長度≥0.5cm的不定芽分別進行切割，得單芽；

將單芽轉接到生根培養基中，在植物組織培養室內培養，培養溫度24±1℃，直至獲得根數≥5根且株高≥3.0cm的生根后白花前胡無菌組培苗；

生根培養基為：1L的1/2MS+0.2mg?NAA+20～30g白砂糖+4～9g瓊脂，pH?5.8±0.2；

4)、組培苗馴化移栽：

將步驟3)所得的生根后白花前胡無菌組培苗放入水培瓶內利用霍格蘭營養液進行水培養，培養溫度為24±1℃，水培瓶做遮光處理；直至當培養至株高≥15cm且根長≥10cm的根至少有5根時，結束此步驟。

2.根據權利要求1所述的白花前胡不定芽的繁殖方法，其特征在于：步驟1)中的消毒為：將外植體材料用70％～75％的乙醇消毒后，用無菌水沖洗；然后用0.1％的HgCl₂消毒10～15min，無菌水沖洗至少3次。

3.根據權利要求2所述的白花前胡不定芽的繁殖方法，其特征在于：步驟1)中，70％～75％乙醇消毒時間為30±5s；0.1％HgCl₂消毒莖尖的時間在12～15min。