[發(fā)明專利]一種基于雙水相體系的亞麻籽環(huán)肽分離純化方法在審
| 申請?zhí)枺?/td> | 202211205219.6 | 申請日： | 2022-09-29 |
| 公開（公告）號： | CN115558014A | 公開（公告）日： | 2023-01-03 |
| 發(fā)明（設(shè)計）人： | 常明;張宇;郭怡雯;劉睿杰;王小三 | 申請（專利權(quán)）人： | 江南大學(xué) |
| 主分類號： | C07K1/14 | 分類號： | C07K1/14 |
| 代理公司： | 無錫承果知識產(chǎn)權(quán)代理有限公司 32373 | 代理人： | 劉清麗 |
| 地址： | 214000 江蘇*** | 國省代碼： | 江蘇;32 |
| 權(quán)利要求書： | 查看更多 | 說明書： | 查看更多 |
| 摘要： | |||
| 搜索關(guān)鍵詞： | 一種 基于 雙水相 體系 亞麻 環(huán)肽 分離 純化 方法 | ||
本發(fā)明公開了一種基于雙水相體系的亞麻籽環(huán)肽分離純化方法，屬于亞麻籽環(huán)肽分離純化領(lǐng)域。包括：構(gòu)建雙水相體系：將小分子醇和鹽溶液進行混合，酸堿調(diào)節(jié)pH，獲得雙水相體系；將所述雙水相體系與亞麻籽環(huán)肽提取物進行混合，分相后取上相，獲得亞麻籽環(huán)肽粗純化產(chǎn)物；將所述亞麻籽環(huán)肽粗純化產(chǎn)物與水按照1∶(1～100)的質(zhì)量比進行混合，進行脫鹽處理，離心分離得到上清液和沉淀，將所述沉淀脫除水分，即可獲得目標(biāo)純化亞麻籽環(huán)肽粉末；對離心分離的上清液，調(diào)節(jié)pH至有明顯沉淀和漂浮物，離心分離得到沉淀物，并添加到所述亞麻籽環(huán)肽提取物中，再次進行步驟2)～4)。該方法成本低，無毒環(huán)保，可實現(xiàn)針對亞麻籽環(huán)肽的大規(guī)模純化生產(chǎn)。
技術(shù)領(lǐng)域
本發(fā)明涉及亞麻籽環(huán)肽分離純化領(lǐng)域，具體涉及一種基于雙水相體系的亞麻籽環(huán)肽分離純化方法。
背景技術(shù)
亞麻籽(又稱胡麻籽)中除了富含n-3系列多不飽和脂肪酸α-亞麻酸的亞麻籽油外，還含有豐富的亞麻籽木酚素、亞麻籽膠、亞麻籽環(huán)肽等功能性成分。其中，亞麻籽環(huán)肽是天然存在于亞麻籽和根莖中的疏水性環(huán)狀植物多肽，由8～10個氨基酸組成，是一種分子量約為1kDa的小分子多肽。截止目前研究，亞麻籽中含有大約38種亞麻籽環(huán)肽已被發(fā)現(xiàn)。由于亞麻籽環(huán)肽氨基酸組成中含有蛋氨酸，在一定條件下可氧化生成蛋氨酸亞砜，進一步氧化生成蛋氨酸砜，因此亞麻籽環(huán)肽具備一定的抗氧化活性，其中環(huán)肽P是亞麻籽油主要苦味來源環(huán)肽E的前體。亞麻籽環(huán)肽除了具有抗氧化活性之外，還具備免疫抑制活性、清除自由基、抗癌、抗炎、抑制破骨細胞分化、螯合金屬離子等多種生理功能。
目前相關(guān)技術(shù)中，對亞麻籽環(huán)肽的提取主要存在兩種提取方式，即從亞麻籽油中提取疏水性亞麻籽環(huán)肽，以及從亞麻籽餅粕中提取亞麻籽環(huán)肽，但是這兩種提取方式均存在一定的弊端。例如中國專利公開號：CN108329376A，使用丙酮從亞麻籽粉中提取亞麻籽油及環(huán)肽，再利用層析柱的方式進行純化，這種提取方法使用的試劑為易制毒試劑丙酮，且柱層析純化方式單次處理量較小，成本較高。中國專利公開號：CN108853193A從亞麻籽餅粕中提取亞麻籽環(huán)肽，該方法有利于提高亞麻籽餅粕的經(jīng)濟價值，但是亞麻籽在經(jīng)過壓榨后，組織結(jié)構(gòu)受損，餅粕中的環(huán)肽會被氧化，并且單獨使用95％乙醇從亞麻籽粕中提取環(huán)肽會有較多的油、蛋白等極性成分殘留，環(huán)肽純度較低需要進一步純化。
因此，如何提供一種低成本、操作簡單，又能滿足亞麻籽環(huán)肽大規(guī)模純化的工藝是被迫切需要的。
發(fā)明內(nèi)容
為克服上述相關(guān)技術(shù)中存在的問題，本發(fā)明提供一種基于雙水相體系的亞麻籽環(huán)肽分離純化方法，該方法成本低，無毒環(huán)保，可實現(xiàn)針對亞麻籽環(huán)肽的大規(guī)模純化生產(chǎn)。
本發(fā)明提供一種基于雙水相體系的亞麻籽環(huán)肽分離純化方法，包括：
構(gòu)建雙水相體系：將小分子醇和鹽溶液進行混合，酸堿調(diào)節(jié)pH，獲得雙水相體系；
亞麻籽環(huán)肽提取物雙水相純化：將所述雙水相體系與亞麻籽環(huán)肽提取物進行混合，分相后取上相，脫除溶劑后，獲得含鹽量較高的獲得含鹽量較高的麻籽環(huán)肽粗純化產(chǎn)物；
將所述亞麻籽環(huán)肽粗純化產(chǎn)物水洗脫鹽：將所述亞麻籽環(huán)肽粗純化產(chǎn)物與水按照1∶(1～100)的質(zhì)量比進行混合，進行脫鹽處理，離心分離得到上清液和沉淀，將所述沉淀脫除水分，獲得目標(biāo)純化亞麻籽環(huán)肽粉末；
調(diào)節(jié)所述離心分離得到上清液的pH至沉淀和漂浮物不再增加，離心分離得到沉淀物，并添加到所述亞麻籽環(huán)肽提取物中，再次進行雙水相純化，即步驟2)。
可選地，步驟1)中，所述的小分子醇是甲醇、乙醇、異丙醇或正丙醇；所述的鹽溶液是磷酸鹽溶液或硫酸鹽溶液。
可選地，步驟1)中，所述的磷酸鹽溶液包括：磷酸氫二鉀溶液、磷酸氫二鈉溶液；所述的硫酸鹽溶液包括：硫酸銨、硫酸鉀、硫酸鈉、硫酸鎂或硫酸鋅。
可選地，步驟1)中，所述的小分子醇是甲醇，所述的鹽溶液是磷酸氫二鉀溶液。
該專利技術(shù)資料僅供研究查看技術(shù)是否侵權(quán)等信息，商用須獲得專利權(quán)人授權(quán)。該專利全部權(quán)利屬于江南大學(xué)，未經(jīng)江南大學(xué)許可，擅自商用是侵權(quán)行為。如果您想購買此專利、獲得商業(yè)授權(quán)和技術(shù)合作，請聯(lián)系【客服】
本文鏈接：http://www.szxzyx.cn/pat/books/202211205219.6/2.html，轉(zhuǎn)載請聲明來源鉆瓜專利網(wǎng)。
