[發(fā)明專利]一種基于雙水相體系的亞麻籽環(huán)肽分離純化方法

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• 申請(qǐng)?zhí)枺?/td>: 202211205219.6
• 申請(qǐng)日: 2022-09-29
• 公開（公告）號(hào): CN115558014A
• 公開（公告）日: 2023-01-03
• 發(fā)明（設(shè)計(jì)）人: 常明;張宇;郭怡雯;劉睿杰;王小三
• 申請(qǐng)（專利權(quán)）人: 江南大學(xué)
• 主分類號(hào): C07K1/14
• 分類號(hào): C07K1/14
• 代理公司: 無(wú)錫承果知識(shí)產(chǎn)權(quán)代理有限公司 32373
• 代理人: 劉清麗

1.一種基于雙水相體系的亞麻籽環(huán)肽分離純化方法，其特征在于，包括：

1)構(gòu)建雙水相體系：將小分子醇和鹽溶液進(jìn)行混合，酸堿調(diào)節(jié)pH，獲得雙水相體系；

2)亞麻籽環(huán)肽提取物雙水相純化：將所述雙水相體系與亞麻籽環(huán)肽提取物進(jìn)行混合，分相后取上相，脫除溶劑，獲得亞麻籽環(huán)肽粗純化產(chǎn)物；

3)將所述亞麻籽環(huán)肽粗純化產(chǎn)物水洗脫鹽：將所述亞麻籽環(huán)肽粗純化產(chǎn)物與水按照1∶(1～100)的質(zhì)量比進(jìn)行混合，進(jìn)行脫鹽處理，離心分離得到上清液和沉淀，將所述沉淀脫除水分，獲得目標(biāo)純化亞麻籽環(huán)肽粉末；

4)調(diào)節(jié)所述離心分離得到上清液的pH至沉淀和漂浮物不再增加，離心分離得到沉淀物，并添加到所述亞麻籽環(huán)肽提取物中，再次進(jìn)行雙水相純化，即步驟2)。

2.如權(quán)利要求1所述的基于雙水相體系的亞麻籽環(huán)肽分離純化方法，其特征在于，步驟1)中，所述的小分子醇是甲醇、乙醇、異丙醇或正丙醇；所述的鹽溶液是磷酸鹽溶液或硫酸鹽溶液。

3.如權(quán)利要求2所述的基于雙水相體系的亞麻籽環(huán)肽分離純化方法，其特征在于，步驟1)中，所述的磷酸鹽溶液包括：磷酸氫二鉀溶液、磷酸氫二鈉溶液；所述的硫酸鹽溶液包括：硫酸銨、硫酸鉀、硫酸鈉、硫酸鎂或硫酸鋅。

4.如權(quán)利要求3所述的基于雙水相體系的亞麻籽環(huán)肽分離純化方法，其特征在于，步驟1)中，所述的小分子醇是甲醇，所述的鹽溶液是磷酸氫二鉀溶液。

5.如權(quán)利要求4所述的基于雙水相體系的亞麻籽環(huán)肽分離純化方法，其特征在于，所述雙水相體系中磷酸氫二鉀的質(zhì)量分?jǐn)?shù)為5％～30％，甲醇的質(zhì)量分?jǐn)?shù)為20％～80％，pH為7～12。

6.如權(quán)利要求5所述的基于雙水相體系的亞麻籽環(huán)肽分離純化方法，其特征在于，所述雙水相體系中K₂HPO₄的質(zhì)量分?jǐn)?shù)為14％～18％，甲醇的質(zhì)量分?jǐn)?shù)為44％～46％，pH為8.7～9.3。

7.如權(quán)利要求1所述的基于雙水相體系的亞麻籽環(huán)肽分離純化方法，其特征在于，步驟2)中，所述亞麻籽環(huán)肽提取物與所述雙水相體系按照1∶(1～120)的質(zhì)量比例進(jìn)行混合。

8.如權(quán)利要求7所述的基于雙水相體系的亞麻籽環(huán)肽分離純化方法，其特征在于，步驟2)中，所述亞麻籽環(huán)肽提取物與所述雙水相體系按照1∶(30～60)的質(zhì)量比例進(jìn)行混合。

9.如權(quán)利要求1所述的基于雙水相體系的亞麻籽環(huán)肽分離純化方法，其特征在于，步驟3)中，所述的脫鹽步驟為水洗脫鹽，至少重復(fù)2次；所述的脫除水分步驟，采用的是凍干方式。

10.如權(quán)利要求1所述的基于雙水相體系的亞麻籽環(huán)肽分離純化方法，其特征在于，步驟4)中，上清液pH調(diào)節(jié)至0～2。