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[發(fā)明專利]離體條件下向百合鱗莖引入熒光染料的方法在審

專利信息
申請(qǐng)?zhí)枺?/td> 202211202219.0 申請(qǐng)日: 2022-09-29
公開(公告)號(hào): CN115541350A 公開(公告)日: 2022-12-30
發(fā)明(設(shè)計(jì))人: 徐蘊(yùn)晨;吳昀;夏宜平;高聰;呂群丹;洪碧偉;閔芮涵 申請(qǐng)(專利權(quán))人: 浙江大學(xué)
主分類號(hào): G01N1/30 分類號(hào): G01N1/30;G01N1/28;G01N21/64
代理公司: 杭州合信專利代理事務(wù)所(普通合伙) 33337 代理人: 沈自軍
地址: 310058 浙江*** 國(guó)省代碼: 浙江;33
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摘要:
搜索關(guān)鍵詞: 條件下 百合 鱗莖 引入 熒光 染料 方法
【權(quán)利要求書】:

1.離體條件下向百合鱗莖引入熒光染料的方法,其特征在于,包括:

步驟S10、以在誘芽培養(yǎng)基中經(jīng)代謝培養(yǎng)的離體百合鱗莖的外層鱗片為待處理鱗片,無菌條件下,在所述待處理鱗片的遠(yuǎn)軸端中部設(shè)置楔形切口,所述楔形切口貫穿維管束;

步驟S20、在所述楔形切口內(nèi)塞入吸水材料,向所述吸水材料注入熒光染料;

步驟S30、注入結(jié)束后,對(duì)所述楔形切口進(jìn)行封閉和避光處理。

2.根據(jù)權(quán)利要求1所述的方法,其特征在于,步驟S10中,利用刀片在所述待處理鱗片的遠(yuǎn)軸端中部切出楔形切口。

3.根據(jù)權(quán)利要求1所述的方法,其特征在于,步驟S20中,吸水材料為醫(yī)用藥棉;

所述熒光染料為CFDA熒光染料溶液,且濃度為1-2mg/mL。

4.根據(jù)權(quán)利要求3所述的方法,其特征在于,每個(gè)外層鱗片注入所述CFDA熒光染料溶液的體積為10-60μL。

5.根據(jù)權(quán)利要求1所述的方法,其特征在于,步驟S30中,所述封閉和避光處理為:依次用封口膜和錫箔紙包裹所述外層鱗片的楔形切口。

6.根據(jù)權(quán)利要求1~5任一所述方法得到的離體百合鱗莖。

7.一種研究離體百合植株同化運(yùn)輸方向和路徑的熒光示蹤方法,其特征在于,包括:

采用權(quán)利要求1~5任一所述方法,得到引入熒光染料的離體百合鱗莖;

將所述離體百合鱗莖置于培養(yǎng)基中進(jìn)行培養(yǎng);

取出培養(yǎng)后的離體百合鱗莖,在擬觀察部位進(jìn)行取樣,并制備成顯微標(biāo)本,對(duì)所述顯微標(biāo)本進(jìn)行顯微觀察和拍照。

8.根據(jù)權(quán)利要求7所述的熒光示蹤方法,其特征在于,所述培養(yǎng)時(shí)間為12-48h。

9.根據(jù)權(quán)利要求7所述的熒光示蹤方法,其特征在于,所述取樣為利用冷凍切片機(jī)對(duì)擬觀察部位進(jìn)行切片。

10.根據(jù)權(quán)利要求7所述的熒光示蹤方法,其特征在于,所述切片厚度為35μm。

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