[發明專利]一種檢測猴痘病毒的試劑及其應用

在審

• 申請號: 202211197813.5
• 申請日: 2022-09-29
• 公開（公告）號: CN116287431A
• 公開（公告）日: 2023-06-23
• 發明（設計）人: 袁靜;薛冠華;馮俊霞;崔曉虎;杜冰;馮燕玲;崔晶花;閆超;趙漢青;甘霖;范政
• 申請（專利權）人: 首都兒科研究所
• 主分類號: C12Q1/70
• 分類號: C12Q1/70;C12N15/11;C12Q1/6844;C12R1/93
• 代理公司: 北京三友知識產權代理有限公司 11127
• 代理人: 韓蕾;張德斌

本發明提供了一種檢測猴痘病毒的試劑及其應用。本發明所述檢測猴痘病毒的試劑包括：針對猴痘病毒A27L基因的RAA檢測引物組；和/或針對猴痘病毒F3L基因的RAA檢測引物組。本發明的檢測方法具有檢測時間短、靈敏度高、特異性強、操作簡單等特點，只需在37～42℃條件下反應5～15min便可分析結果；對于猴痘病毒(Monkeypox?virus)快速檢出具有非常重要的意義，具有較大的應用前景。

技術領域

本發明涉及分子生物學檢測技術領域，更具體的說是涉及一種檢測猴痘病毒的試劑及其應用。

背景技術

猴痘病毒(Monkeypox?virus)屬于痘病毒中的正痘病毒屬，是一種雙鏈DNA病毒，與天花病毒關系較近。猴痘病毒感染人體后的潛伏期為5至21天。其臨床表現主要包括發熱、劇烈頭痛、淋巴結腫大、背痛、皮疹、肌肉痛等。作為一種人畜共患病，猴痘病毒傳播方式主要分為兩種，由動物傳播到人類和人傳人。松鼠、袋鼠、睡鼠或其他嚙齒動物身上均可感染猴痘病毒。人類主要通過被已感染的動物咬傷，或直接接觸被感染動物的血液、體液而感染猴痘；或者直接、長時間面對面與患者接觸，通過呼吸飛沫、體液以及病毒污染的物品傳播。

鑒于猴痘病毒的流行及其高致死性，一種快速、特異性的診斷方法，在早期控制疾病的傳播十分重要。面臨發病例數不斷增加，基層醫院實驗室檢測條件有限等問題，開發一種簡單、快速和特異性高的診斷方法是非常有必要的。

發明內容

為解決上述問題，本發明提供一種檢測猴痘病毒的試劑及其應用。

本發明的一個目的在于提供一種檢測猴痘病毒的試劑。

本發明的另一個目的在于提供用于檢測猴痘病毒的試劑盒。

本發明的另一個目的在于提供所述試劑或試劑盒在檢測猴痘病毒中的應用。

一方面，本發明提供一種檢測猴痘病毒的試劑，該試劑包括：

針對猴痘病毒A27L基因的RAA檢測引物組；和/或

針對猴痘病毒F3L基因的RAA檢測引物組。

根據本發明的具體實施方案，其中，所述A27L基因包括如SEQ?ID?NO:1所示的序列；

所述F3L基因包括如SEQ?ID?NO:8所示的序列。

根據本發明的具體實施方案，其中，所述針對猴痘病毒A27L基因的RAA檢測引物組包括如SEQ?ID?NO.2所示序列的引物和如SEQ?ID?NO.3所示序列的引物：

5’-TCAGCGATTCCTATAGCCGTTCTTGTATTTGTG-3’(SEQ?ID?NO.2)；

5’-GTCTAAGCCTATTACTAATACTGGTATTGA-3’(SEQ?ID?NO.3)。

根據本發明的具體實施方案，其中，所述試劑還包括針對猴痘病毒A27L基因的探針，所述探針包括如SEQ?ID?NO.4所示序列的探針：

5’-CTAATGGATTGTATGGCTTGATAGCATCATCTTTATCATTATTAGGTGG-3’(SEQ?ID?NO.4)；

優選地，所述探針還包括在SEQ?ID?NO.4所示序列基礎上經修飾的探針。

優選地，所述修飾包括：探針序列5’端堿基采用熒光報告基團修飾，同時探針序列3’端堿基采用熒光淬滅基團修飾；

優選地，所述修飾包括：

探針序列離5’端堿基數32bp的位置上的堿基T采用熒光報告基團FAM修飾，探針序列離5’端堿基數34bp的位置上的堿基T用熒光淬滅基團BHQ修飾，探針序列離5’端堿基數33bp的位置上的堿基T用四氫呋喃殘基(THF)替換。