[發明專利]含不同截短PstS1融合蛋白AP的新型結核病亞單位疫苗的制備和應用

在審

• 申請號: 202211192711.4
• 申請日: 2022-09-28
• 公開（公告）號: CN116082520A
• 公開（公告）日: 2023-05-09
• 發明（設計）人: 李浩;曾令媛
• 申請（專利權）人: 中國農業大學
• 主分類號: C07K19/00
• 分類號: C07K19/00;C12N15/62;A61K39/04;A61P31/06
• 代理公司: 北京清亦華知識產權代理事務所(普通合伙) 11201
• 代理人: 顧鮮紅

1.一種融合蛋白，其特征在于，包括：

第一肽段，所述第一肽段包含Ag85A片段；

第二肽段，所述第二肽段包括PstS1片段，所述第一肽段與所述第二肽段相連。

2.根據權利要求1所述的融合蛋白，其特征在于，所述第一肽段的C端與所述第二肽段的N端相連；或者

所述第二肽段的C端與所述第一肽段的N端相連；

任選地，所述Ag85A片段為Ag85A全長肽鏈；

任選地，所述Ag85A片段具有如SEQ?ID?NO:1所示的氨基酸序列或者與SEQ?ID?NO:1具有至少95％相似性的氨基酸序列；

任選地，所述PstS1片段包括選自PstS1全長肽鏈和PstS1抗原表位肽中的至少之一；

任選地，所述PstS1片段具有如SEQ?ID?NO:2～4任一項所示的氨基酸序列或者與SEQID?NO:2～4任一項具有至少95％相似性的氨基酸序列。

3.根據權利要求1所述的融合蛋白，其特征在于，進一步包括連接肽；

任選地，所述連接肽的N端與所述第一肽段的C端相連，所述連接肽的C端與所述第二肽段的N端相連；或者

所述連接肽的N端與所述第二肽段的C端相連，所述連接肽的C端與所述第一肽段的N端相連；

任選地，所述連接肽的氨基酸序列為(GGGGS)_n，其中n為1、2、3、4、5、6、7、8、9或10，更優選為2或3；

任選地，所述連接肽包括SEQ?ID?NO:5所示的氨基酸序列；

任選地，所述融合蛋白進一步包括標簽；

任選地，所述第一肽段的C端與所述第二肽段的N端相連，所述標簽與所述第二肽段的C端相連或所述標簽與所述第一肽段的N端相連；或者

所述第二肽段的C端與所述第一肽段的N端相連，所述標簽與所述第一肽段的C端相連或所述標簽與所述第二肽段的N端相連；

任選地，所述標簽為HIS標簽、FLAG標簽、HA標簽、GST標簽、Strep?II標簽和MBP標簽中的至少之一；

任選地，所述HIS標簽具有如SEQ?ID?NO:6所示的氨基酸序列；

任選地，所述融合蛋白具有如SEQ?ID?NO:7～9任一項所示的氨基酸序列。

4.一種核酸分子，其特征在于，所述核酸分子編碼權利要求1～3任一項所述的融合蛋白；

任選地，所述核酸分子為DNA。

5.一種表達載體，其特征在于，攜帶權利要求4所述的核酸分子；

任選地，所述表達載體為真核表達載體；

優選地，所述表達載體為慢病毒載體。

6.一種重組細胞，其特征在于，包括：

攜帶權利要求4所述的核酸分子或權利要求5所述的表達載體；或，

表達權利要求1～3任一項所述的融合蛋白；

任選地，所述重組細胞是通過將權利要求5所述的表達載體引入至宿主細胞中而獲得的；

任選地，所述重組細胞包括真核細胞或原核細胞。

7.權利要求1～3任一項所述的融合蛋白、權利要求4所述的核酸分子、權利要求5所述的表達載體或權利要求6所述的重組細胞在制備亞單位疫苗中的用途。

8.一種亞單位疫苗，其特征在于，包括：

權利要求1～3任一項所述的融合蛋白。

9.根據權利要求1所述的亞單位疫苗，其特征在于，進一步包括藥學上可接受的輔料；

任選地，所述輔料包括佐劑；

任選地，所述佐劑包括選自Poly?IC佐劑、鋁佐劑、弗氏佐劑、CpG?ODN、DDA、MPLA、IC31、AS01和AS03中的至少之一；

任選地，所述融合蛋白和所述佐劑的體積比為3:1；

任選地，所述佐劑為氫氧化鋁佐劑。

10.權利要求8或9所述的亞單位疫苗在制備藥物中的用途，所述藥物用于加強BCG的免疫效應或者用于預防和/或治療結核病。