[發(fā)明專利]病毒核酸樣本稀釋劑、病毒核酸樣本提取試劑盒和病毒核酸提取方法

在審

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• 申請日: 2022-09-27
• 公開（公告）號: CN115386575A
• 公開（公告）日: 2022-11-25
• 發(fā)明（設計）人: 沈子明;趙百慧;李春燕;張春雷
• 申請（專利權）人: 上海伯杰醫(yī)療科技股份有限公司
• 主分類號: C12N15/10
• 分類號: C12N15/10;C12Q1/6806;C12R1/92
• 代理公司: 北京超凡宏宇專利代理事務所(特殊普通合伙) 11463
• 代理人: 劉建榮

本發(fā)明涉及分子檢測技術領域，尤其是涉及病毒核酸樣本稀釋劑、病毒核酸樣本提取試劑盒和病毒核酸提取方法。本發(fā)明提供的病毒核酸樣本釋放劑，能夠兼容多種采樣套裝，同時通過調(diào)整組分的種類和比例，最大限度的降低所使用的表面活性劑的臨界膠束濃度，既能保證對細胞和病原體的裂解也能減少對后續(xù)檢測體系的抑制作用。本發(fā)明在添加離子交換樹脂的情況下，能對樣本中蛋白質(zhì)和鈣鎂等對后續(xù)反應有影響的金屬離子進行吸附，也能促進細胞和病毒裂解，增強體系的兼容性。本發(fā)明的檢測體系兼容性較好，能同時兼容多種qPCR檢測體系，也能用于等溫RAA擴增體系。不僅適用于液體檢測體系，也能用于樣本量較大的干粉檢測體系。

技術領域

本發(fā)明涉及分子檢測技術領域，尤其是涉及病毒核酸樣本稀釋劑、病毒核酸樣本提取試劑盒和病毒核酸提取方法。

背景技術

分子檢測技術得到了快速的發(fā)展。分子診斷技術是一種基于病原體核酸進行檢測的技術，通過識別病原體的特異性核酸序列，對病原體進行檢測。因此如何得到適于反應的核酸就成為了能否正確檢測出病原體的關鍵步驟，核酸提取的速度也成為了限制檢測速度的瓶頸。常規(guī)的離心柱法和磁珠法核酸提取，不僅需要匹配離心機、磁力架等特殊儀器，同時步驟也較為繁瑣，都需要經(jīng)過裂解、洗滌、洗脫等步驟。

在檢測壓力逐漸增大的情況下，家庭自檢和快速檢測的需求逐漸被人們關注。面對這種需求，要求核酸提取的步驟不依賴于儀器，同時具備一定的檢測能力。但是市面上的樣本核酸釋放劑類產(chǎn)品，釋放核酸后的效果不盡如人意，且大部分核酸釋放劑產(chǎn)品僅針對一種檢測方式，在可以快速擴增的等溫檢測體系中無法正常使用。

鑒于此，特提出本發(fā)明。

發(fā)明內(nèi)容

本發(fā)明的目的在于，針對現(xiàn)有核酸釋放劑產(chǎn)品的不足，提供了一種更靈活，使用場景更加豐富的病毒核酸釋放劑，期望所述的這種病毒核酸釋放劑能在常溫下使用，搭配適配的耗材還可以在無能源環(huán)境下進行加熱使用，獲得更好的核酸釋放效果。

為了解決上述技術問題，實現(xiàn)上述目的，本發(fā)明提供以下技術方案：

第一方面，本發(fā)明提供病毒核酸樣本稀釋劑，包括：陰離子表面活性劑、氫氧化鈉、EDTA、海藻糖和離子交換樹脂，按照質(zhì)量體積比，所述EDTA 加入量為0～3％，優(yōu)選為1％；所述陰離子表面活性劑的加入量為0.010％～0.050％，優(yōu)選為0.02％；所述離子交換樹脂加入量為0～5％，優(yōu)選為2.5％。

在可選的實施方式中，所述陰離子表面活性劑選自十二烷基硫酸鈉、十四烷基硫酸鈉、十六烷基硫酸鈉或十八烷基硫酸鈉，優(yōu)選為十六烷基硫酸鈉。

在可選的實施方式中，所述氫氧化鈉的濃度為0.16～1.28mM，優(yōu)選為 0.32mM。

在可選的實施方式中，還包括多元醇類、氯化鈉或NP-40中的一種或兩種以上組合。

在可選的實施方式中，所述多元醇選自乙二醇或丙二醇。

優(yōu)選地，按照質(zhì)量體積比，所述多元醇為0～10％的丙二醇，進一步優(yōu)選地，所述多元醇為5％的丙二醇。

優(yōu)選地，按照質(zhì)量體積比，所述NP-40的濃度為1％～5％，優(yōu)選為1％；

優(yōu)選地，所述氯化鈉的濃度為50～150mM，優(yōu)選為100mM。

在可選的實施方式中，所述離子交換樹脂選自chelex或bio-rex 70，所述chelex的規(guī)格為50～400mesh。

優(yōu)選地，所述離子交換樹脂為bio-rex 70。

在可選的實施方式中，所述海藻糖濃度為0.05～0.1mM，優(yōu)選為0.075mM。

第二方面，本發(fā)明提供病毒核酸樣本提取試劑盒，包括前述實施方式任一項所述的病毒核酸樣本稀釋劑。

優(yōu)選地，還包括加熱裝置。