[發明專利]一種快速制備尿激酶原料的方法在審
| 申請號： | 202211143608.0 | 申請日： | 2022-09-20 |
| 公開（公告）號： | CN115386563A | 公開（公告）日： | 2022-11-25 |
| 發明（設計）人： | 顧京;唐維;王德軍;倪萌;李樂楓;金偉;熊倩;趙寶營;曾文;郭芬;熊心磊;丁晶 | 申請（專利權）人： | 河南省尤里卡生物科技有限公司 |
| 主分類號： | C12N9/72 | 分類號： | C12N9/72 |
| 代理公司： | 北京精金石知識產權代理有限公司 11470 | 代理人： | 張天琦 |
| 地址： | 453600 河南省新鄉*** | 國省代碼： | 河南;41 |
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| 摘要： | |||
| 搜索關鍵詞： | 一種 快速 制備 尿激酶 原料 方法 | ||
1.一種尿激酶原料的制備方法，其特征在于，包括以下步驟：
(1)將尿液中加入改性硅膠進行吸附；
(2)用水沖洗改性硅膠，用洗脫液Ⅰ進行洗脫，收集洗脫液；
(3)洗脫液中加入硫酸銨溶液，攪拌，取上清；再補加硫酸銨，攪拌溶解后，過濾，收集沉淀，制得尿激酶粗品；
(4)取尿激酶粗品加入磷酸進行溶解，過濾，濃縮得到濃縮液；
(5)先用洗脫液Ⅱ平衡吸附柱，再將步驟(4)中得到的濃縮液上吸附柱，再次用洗脫液Ⅱ洗脫吸附柱，收集洗脫液；
(6)步驟(5)中得到的洗脫液進行過濾、冷凍干燥后得到尿激酶原料。
2.根據權利要求1所述的制備方法，其特征在于，步驟(1)中所述改性硅膠為硅烷偶聯劑改性硅膠、氨基改性硅膠的一種或兩種。
3.根據權利要求2所述的制備方法，其特征在于，所述硅烷偶聯劑改性硅膠、氨基改性硅膠的重量比為2-2.5：1-1.5。
4.根據權利要求1所述的制備方法，其特征在于，步驟(2)中所述洗脫液Ⅰ為含氯化鈉、磷酸的混合液，所述洗脫的過程包括：先用含0.1-0.2mol/L氯化鈉、0.1-0.15mol/L磷酸的混合液進行洗脫，再用含0.3-0.4mol/L氯化鈉、0.2-0.25mol/L磷酸的混合液進行洗脫。
5.根據權利要求1所述的制備方法，其特征在于，步驟(3)中所述洗脫液、硫酸銨溶液、硫酸銨的用量比為80-100mL：80-90mL：1g。
6.根據權利要求5所述的制備方法，其特征在于，所述硫酸銨溶液的濃度為1.0-1.5mol/L。
7.根據權利要求1所述的制備方法，其特征在于，步驟(4)中所述尿激酶粗品、磷酸的用量比為1g：4-6mL。
8.根據權利要求1所述的制備方法，其特征在于，步驟(5)中所述洗脫液Ⅱ為0.5-0.6mol/L的磷酸鈉溶液。
9.根據權利要求1所述的制備方法，其特征在于，步驟(5)中所述吸附柱為弱陰離子交換柱，所述弱陰離子交換柱的填料包括D201、D301、D311、DEAE的一種或幾種。
10.根據權利要求1所述的制備方法，其特征在于，步驟(6)中所述過濾為用20nm的濾芯進行過濾。
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