[發明專利]一種高表達和高活性纖連蛋白突變體及其應用有效
| 申請號: | 202211139871.2 | 申請日: | 2022-09-19 |
| 公開(公告)號: | CN116063459B | 公開(公告)日: | 2023-10-13 |
| 發明(設計)人: | 熊盛;劉啟偉;陳偉;謝心善;謝秋玲;彭燕輝;王一婷 | 申請(專利權)人: | 暨南大學;廣州啟點生物科技有限公司;彭氏(惠州)實業發展有限公司 |
| 主分類號: | C07K14/78 | 分類號: | C07K14/78;C12N15/12;C12N15/70;C12N5/00;A61K38/39;A61P43/00;A61P7/04;A61P17/02 |
| 代理公司: | 合肥匯融專利代理有限公司 34141 | 代理人: | 王秀芳 |
| 地址: | 510000 廣*** | 國省代碼: | 廣東;44 |
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| 摘要: | |||
| 搜索關鍵詞: | 一種 表達 活性 蛋白 突變體 及其 應用 | ||
1.一種高表達和高活性纖連蛋白突變體,其特征在于,所述高表達和高活性纖連蛋白突變體為優化后的纖連蛋白突變體D8910,所述纖連蛋白突變體D8910為選取纖連蛋白與細胞粘附活性密切相關的結構域,構建得到。
2.根據權利要求1所述的一種高表達和高活性纖連蛋白突變體,其特征在于:所述優化的纖連蛋白突變體D8910的核苷酸序列如SEQ?ID?NO.1。
3.根據權利要求1所述的一種高表達和高活性纖連蛋白突變體,其特征在于:所述優化的方式為通過翻譯暫停理論對纖連蛋白突變體D8910的核苷酸序列進行優化。
4.根據權利要求3所述的一種高表達和高活性纖連蛋白突變體,其特征在于:所述翻譯暫停理論具體的設計方式為設計編碼纖連蛋白的核苷酸序列,在不改變纖連蛋白氨基酸序列的情況下,將纖連蛋白密碼子中翻譯速度較快的密碼子替換成翻譯速度較慢的密碼子,制造翻譯暫停位點。
5.根據權利要求1所述的一種高表達和高活性纖連蛋白突變體,其特征在于:所述高表達和高活性纖連蛋白突變體的制備方法為將優化后的纖連蛋白突變體D8910與表達載體構建成重組載體,再將重組載體轉化到宿主細胞中進行表達、純化,來獲得高表達和高活性的D8910重組纖連蛋白。
6.根據權利要求5所述的一種高表達和高活性纖連蛋白突變體,其特征在于:所述表達載體為質粒pET-28系列載體,所述宿主細胞為大腸桿菌。
7.一種如權利要求1-6所述的高表達和高活性纖連蛋白突變體的應用,其特征在于:所述高表達和高活性纖連蛋白突變體在促細胞增殖、遷移、粘附活性中的應用。
8.根據權利要求7所述的一種高表達和高活性纖連蛋白突變體的應用,其特征在于:所述應用為在制備促進細胞遷移、黏附、增殖、止血及組織修復等產品中的應用。
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