[發(fā)明專利]一種用于檢測貓細(xì)小病毒的引物和TaqMan探針及其應(yīng)用在審
| 申請?zhí)枺?/td> | 202211083435.8 | 申請日: | 2022-09-06 |
| 公開(公告)號: | CN115725788A | 公開(公告)日: | 2023-03-03 |
| 發(fā)明(設(shè)計(jì))人: | 李淑艷;王勇;穆苑苑;劉璇;霍欣蕊;吳海強(qiáng);謝祥宇;王潤 | 申請(專利權(quán))人: | 安徽農(nóng)業(yè)大學(xué) |
| 主分類號: | C12Q1/70 | 分類號: | C12Q1/70;C12Q1/686;C12N15/11 |
| 代理公司: | 北京盛詢知識(shí)產(chǎn)權(quán)代理有限公司 11901 | 代理人: | 張先蓉 |
| 地址: | 230036 安徽*** | 國省代碼: | 安徽;34 |
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| 摘要: | |||
| 搜索關(guān)鍵詞: | 一種 用于 檢測 細(xì)小 病毒 引物 taqman 探針 及其 應(yīng)用 | ||
1.一種檢測貓細(xì)小病毒的引物和熒光探針,其特征在于,所述引物包括上游檢測引物和下游檢測引物,其核苷酸序列如SEQ ID NO:1-2所示;所述熒光探針的核苷酸序列如SEQID NO:3所示。
2.如權(quán)利要求1所述的引物和熒光探針,其特征在于,所述貓細(xì)小病毒為貓查帕病毒。
3.如權(quán)利要求1所述的引物和熒光探針,其特征在于,所述熒光探針的5'端的報(bào)告熒光基團(tuán)為FAM,3'端的猝滅熒光基團(tuán)為BHQ1。
4.一種檢測貓細(xì)小病毒的試劑盒,其特征在于,包括權(quán)利要求1-3任一項(xiàng)所述的引物和熒光探針。
5.一種非疾病診斷目的的檢測貓細(xì)小病毒的方法,其特征在于,包括:利用權(quán)利要求1-3任一項(xiàng)所述的引物和熒光探針進(jìn)行實(shí)時(shí)熒光定量反應(yīng),反應(yīng)結(jié)束后,將模板DNA的Ct值與標(biāo)準(zhǔn)曲線對照,得到模板DNA中貓細(xì)小病毒目的基因片段拷貝濃度,基于得到的拷貝濃度判斷是否含有貓細(xì)小病毒。
6.如權(quán)利要求5所述的方法,其特征在于,利用所述引物和熒光探針進(jìn)行實(shí)時(shí)熒光定量反應(yīng)的反應(yīng)體系包括:2×TaqMan Fast qPCR預(yù)混液(低ROX)10μL、ddH2O 8μL、上游引物0.4μL、下游引物0.4μL、模板1μL和0.2μL熒光探針;反應(yīng)程序:94℃180s、94℃5s、60℃30s,40個(gè)循環(huán)。
7.如權(quán)利要求1-3任一項(xiàng)所述的引物和熒光探針在制備檢測貓細(xì)小病毒產(chǎn)品中的應(yīng)用。
8.如權(quán)利要求7所述的應(yīng)用,其特征在于,所述產(chǎn)品包括藥物、試劑或者試劑盒。
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