[發明專利]提高副干酪乳桿菌JY062胞外多糖產量的制法

有效

• 申請號: 202211081420.8
• 申請日: 2022-09-06
• 公開（公告）號: CN115161364B
• 公開（公告）日: 2022-12-09
• 發明（設計）人: 姜毓君;滿朝新;張宇;楊鑫焱;苗超
• 申請（專利權）人: 東北農業大學
• 主分類號: C12P19/04
• 分類號: C12P19/04;C12N1/38;C12N1/20;C12R1/225
• 代理公司: 南京群邁知識產權代理有限公司 32690
• 代理人: 安士影

1.一種提高副干酪乳桿菌（Lactobacillus paracasei）JY062胞外多糖產量的制法，其特征在于，包括以下步驟：

步驟一，從基因層面和表型微生物碳源利用層面確定副干酪乳桿菌JY062生成胞外多糖可利用的碳源；所述可利用的碳源包括甘露糖、海藻糖、半乳糖、果糖、葡萄糖和乳糖；

步驟二，胞外多糖制備工藝優化；

步驟三，優化可利用的碳源；優化后的可利用的碳源包括：等質量添加的甘露糖、果糖、葡萄糖和半乳糖；

采用初始pH為6，以甘露糖、果糖、葡萄糖和半乳糖為復合碳源的優化MRS培養基，34℃下發酵24h制備胞外多糖；胞外多糖的產量由7.70g/L提高到13.31g/L，產量提升72.85％，胞外多糖純度由88.513μg/mL提升到93.852μg/mL；

所述基因層面的方法為：通過基因組分析，確定了副干酪乳桿菌JY062利用PTS磷酸轉移酶系統將甘露糖、海藻糖、半乳糖和果糖轉運到細胞內，葡萄糖和乳糖通過滲透作用進入細胞內；

所述表型微生物碳源利用層面的方法為：將活化后的副干酪乳桿菌JY062菌株在平板上進行三區劃線，固體培養基培養48h后，用Inoculatorz棉簽挑取直徑3mm的菌落到接種液IF3中，配成菌懸液；使用棉簽少量多次蘸取菌落，將菌懸液輕輕攪拌均勻，保證菌懸液不起氣泡，并用濁度儀檢測，調節菌懸液的濃度至90-98%T，T為濁度單位；在Biolog GenIII微孔板中，每孔加入100μL的菌懸液，之后將微孔板直接放入OmniLog的孵育、讀數儀中，37℃培養48h，分析菌株可利用的碳源。