[發(fā)明專利]CLDN18.2抗體及其用途

在審

• 申請?zhí)枺?/td>: 202211071490.5
• 申請日: 2020-07-10
• 公開（公告）號: CN116041512A
• 公開（公告）日: 2023-05-02
• 發(fā)明（設(shè)計）人: 靳照宇;李蕓;李鋒;霍耐凡;金秀梅;任麗;閆哲賢
• 申請（專利權(quán)）人: 明濟(jì)生物制藥（北京）有限公司
• 主分類號: C07K16/28
• 分類號: C07K16/28;C12N15/13;C12N15/85;C12N5/10;A61K39/395;A61K47/68;A61K45/06;A61P35/00
• 代理公司: 北京市柳沈律師事務(wù)所 11105
• 代理人: 凃滔;李芳芳

提供了結(jié)合CLDN18.2的抗體及其去巖藻糖化的形式。還提供了制備上述抗體的方法，包含抗體的綴合物和組合物，及其在治療疾病例如癌癥中的用途。

本申請是申請?zhí)枮?02080046257.4，優(yōu)先權(quán)日為2019年07月12日，申請日為2020年7月10日，發(fā)明名稱為“CLDN18.2抗體及其用途”的發(fā)明專利申請的分案申請。

本申請要求于2019年07月12日遞交的申請?zhí)枮镃N?201910628018.9，發(fā)明名稱為“CLDN18.2抗體及其用途”的中國專利申請的優(yōu)先權(quán)，在此全文引用上述中國專利申請公開的內(nèi)容以作為本申請的一部分。

技術(shù)領(lǐng)域

本公開涉及免疫治療領(lǐng)域。具體而言，本公開涉及結(jié)合CLDN18.2的抗體及其去巖藻糖化的形式，及其在治療疾病特別是癌癥中的應(yīng)用。

技術(shù)背景

包括胃癌及食道癌在內(nèi)的上消化道腫瘤是一種全球常見，預(yù)后較差的惡性腫瘤。胃癌在中國尤其高發(fā)，全球有近42％的胃癌新發(fā)病例集中在中國。由于缺乏早期診斷，約80％胃癌患者發(fā)現(xiàn)時已是晚期。由于胃癌對常規(guī)化療藥物不夠敏感，晚期胃癌的五年生存率極低，并已成為中國第三大致死的惡性腫瘤。因此，近年的研究致力于尋找胃癌特異性的靶向治療。

封閉蛋白(Claudin)家族蛋白是廣泛分布于上皮細(xì)胞中的緊密連接結(jié)構(gòu)的主要組成部分。和其它封閉蛋白家族蛋白的結(jié)構(gòu)類似，CLDN18.2是分子量約27.8kd，具有四個跨膜區(qū)的膜蛋白，且具有兩個較短的胞外區(qū)EC1和EC2。與其它封閉蛋白家族蛋白不同的是，在正常組織中CLDN18.2非常特異地僅表達(dá)于胃部高度分化的上皮細(xì)胞中(Tureci?O?et?al.,Gene,2011)。在來源于胃上皮細(xì)胞的腫瘤中，有很高比例的腫瘤細(xì)胞表面表達(dá)CLDN18.2。在胃癌細(xì)胞的淋巴結(jié)和其它組織轉(zhuǎn)移腫瘤中，也可以檢測到高水平的CLDN18.2表達(dá)(WollS.et?al.,Int.J.Cancer,2013)。除胃癌外，也有很高比例的膽管癌、食道癌和胰腺癌等腫瘤細(xì)胞中表達(dá)CLDN18.2。作為特異性表面標(biāo)志物，CLDN18.2成為癌癥治療的潛在靶點(diǎn)。研發(fā)針對CLDN18.2的高效抗體藥物將為多種癌癥的治療提供可能，具有巨大的應(yīng)用潛力和市場價值。

治療性單克隆抗體殺傷腫瘤細(xì)胞的主要作用機(jī)制之一是ADCC效應(yīng)(抗體依賴性細(xì)胞介導(dǎo)的細(xì)胞毒性，antibody?dependent?cell?mediated?cytotoxicity)。通過治療性抗體的抗原識別段(Fab)與腫瘤細(xì)胞表面的特異性抗原結(jié)合后，利用抗體恒定區(qū)(Fc)與表達(dá)FC受體(FcγR)的效應(yīng)細(xì)胞結(jié)合來激活效應(yīng)細(xì)胞的細(xì)胞殺傷活性，從而分泌細(xì)胞毒性介質(zhì)包括顆粒酶和穿孔素等，最終導(dǎo)致靶細(xì)胞(腫瘤細(xì)胞)的溶解破壞。抗體對抗原的結(jié)合力強(qiáng)弱，抗原表達(dá)豐度以及抗體FC區(qū)和效應(yīng)細(xì)胞表面的FC受體的結(jié)合力強(qiáng)弱均可影響ADCC效應(yīng)的強(qiáng)度，進(jìn)而影響癌癥的治療效果(Jefferis?and?Lund,2002)。

發(fā)明概述

本公開提供了新的抗CLDN18.2的抗體。上述抗體能夠以高親和力和特異性結(jié)合CLDN18.2，并介導(dǎo)效應(yīng)細(xì)胞對表達(dá)CLDN18.2的靶細(xì)胞(例如腫瘤細(xì)胞)的殺傷。此外，還生成了上述抗體的去巖藻糖化形式，其能夠比普通抗體更好地結(jié)合FcγRIIa并誘導(dǎo)ADCC效應(yīng)。

相應(yīng)地，在一方面，本公開涉及一種結(jié)合CLDN18.2的抗體或其抗原結(jié)合片段，所述抗體具有以下重鏈CDR(CDRH)和輕鏈CDR(CDRL)：

a.如SEQ?ID?NO:1中所示的重鏈可變區(qū)(VH)中的CDRH1、CDRH2和CDRH3；和如SEQID?NO:6中所示的輕鏈可變區(qū)(VL)中的CDRL1、CDRL2和CDRL3；

b.如SEQ?ID?NO:11中所示的VH中的CDRH1、CDRH2和CDRH3；和如SEQ?ID?NO:16中所示的VL中的CDRL1、CDRL2和CDRL3；