[發明專利]一種骨髓上清液及其在細胞培養中的應用

有效

• 申請號: 202211068174.2
• 申請日: 2022-09-02
• 公開（公告）號: CN115125192B
• 公開（公告）日: 2023-01-20
• 發明（設計）人: 孟安明;張峻峰;馬騰蛟;胡加鑫;柯嵐;曹春偉;王海龍;張歡
• 申請（專利權）人: 廣州國家實驗室
• 主分類號: C12N5/071
• 分類號: C12N5/071;C12N5/0775;C12N5/0789;A61K35/28;A61P17/02;A61P43/00
• 代理公司: 北京睿陽聯合知識產權代理有限公司 11758
• 代理人: 張穎

1.一種骨髓上清液，其通過對新生哺乳動物的骨髓樣品進行處理獲得，所述新生哺乳動物選自出生1天至1個月的牛，

其中，所述處理包括：

將所述骨髓樣品與緩沖液混合，使骨髓內容物在緩沖液中溶解、釋放；

將溶解釋放后的混合物進行固液分離，收集上清液；

對所收集的上清液進行除菌處理和內毒素去除處理；

所述緩沖液中包括抗凝血劑和蛋白酶抑制劑。

2.根據權利要求1所述的骨髓上清液，其特征在于，所述緩沖液選自PBS磷酸鹽緩沖溶液、Hank's平衡鹽溶液、碳酸鹽緩沖液、硼酸鹽緩沖液、枸櫞酸鹽緩沖液、酒石酸鹽緩沖液或三羥甲基甲烷-鹽酸緩沖液中的一種或多種。

3.一種培養基，其包括基礎培養基和權利要求1或2所述的骨髓上清液。

4.根據權利要求3所述的培養基，其特征在于，所述培養基不含有血清，或含有0.1wt%-20wt%的血清。

5.一種細胞的培養方法，其包括在添加權利要求1或2所述的骨髓上清液的培養基中、或在權利要求3或4所述的培養基中培養細胞的步驟。

6.根據權利要求5所述的培養方法，其特征在于，所述細胞選自干細胞、原代細胞或永生化細胞；

所述干細胞選自間充質干細胞、造血干細胞、胚胎干細胞、神經干細胞、皮膚干細胞、脂肪干細胞、視網膜干細胞、肝干細胞或胰腺干細胞；

所述原代細胞選自哺乳動物肺上皮細胞、腸上皮細胞、成骨細胞、血管內皮細胞的一種或多種；

所述永生化細胞選自人胚腎上皮細胞HEK293、人成纖維細胞、小鼠成纖維細胞中的一種或多種。

7.根據權利要求5所述的培養方法，其特征在于，所述細胞選自哺乳動物細胞，所述哺乳動物選自人、小鼠、大鼠、犬、貓、兔子、豬、猴、馬、牛或羊。

8.權利要求1或2所述的骨髓上清液、權利要求3或4所述的培養基或權利要求5-7中任一項所述的培養方法在細胞培養或擴增中的應用。

9.根據權利要求8所述的應用，其特征在于，用于培養非自體細胞。

10.權利要求5-7中任一項所述的培養方法獲得的細胞或其細胞產物在制備藥物、腫瘤模型、保健品或護理用品或在篩選抑瘤靶點、篩選藥物中的應用。

11.根據權利要求10所述的應用，其特征在于，所述細胞或其細胞產物用于制備治療心血管疾病、肝硬化、神經系統疾病、膝關節半月板部分切除損傷修復、自身免疫性疾病、免疫調節、抗炎、皮膚組織工程治療或組織損傷修復的藥物；和/或用于制備治療惡性血液病、重型再生障礙性貧血、異常免疫病、代謝病或極重度骨髓型急性放射病的藥物。

12.一種制劑，其包括權利要求1或2所述的骨髓上清液和藥學上可接受的載體。

13.權利要求12所述的制劑在用于制備再生醫學相關制劑中的應用。