[發明專利]一種反應型咖啡酰基水合肼分子熒光探針及其制備方法與應用

在審

• 申請號: 202211065442.5
• 申請日: 2022-09-01
• 公開（公告）號: CN115322091A
• 公開（公告）日: 2022-11-11
• 發明（設計）人: 姜倩;宋健;趙平;楊曉琴;張穎君;饒小平;朱國磊
• 申請（專利權）人: 西南林業大學
• 主分類號: C07C67/08
• 分類號: C07C67/08;C07C69/732;C09K11/06;G01N21/64
• 代理公司: 北京奧肯律師事務所 11881
• 代理人: 張曉欣

1.一種反應型咖啡酰基水合肼分子熒光探針，其特征在于：包括反應型咖啡酰基有機熒光探針的制備以及靈敏性、專一性水合肼分子的熒光檢測。

2.一種反應型咖啡酰基水合肼分子熒光探針制備方法，其特征在于，具體包括以下步驟：

S1.初步反應

將2.8mmol咖啡酸、30mL乙醇和0.5mL濃硫酸依次加入三口燒瓶中，再下加熱回流，采用薄層色譜跟蹤反應進程，至咖啡酸完全消失后反應終止；

S2.生成粗物

反應物減壓濃縮回收溶劑后，用0.3-0.5L乙酸乙酯萃取3次，合并有機相，然后用飽和食鹽水洗滌至中性，有機層進行干燥，過濾后，回收溶劑，得到咖啡酸乙酯粗產物；

S3.最終生成

咖啡酸乙酯粗產物通過硅膠色譜柱層析分離，回收溶劑后得到黃色固體咖啡酸乙酯產物；

S4.靈敏性檢測的探針制備

將咖啡酸乙酯溶于DMF/H₂O緩沖溶液配制成10μmol/L的溶液，將水合肼分子分別溶于蒸餾水配成濃度為0,2.5,5,7.5,10,12.5,15,17.5,20,22.5,25,27.5,30,32.5,35,37.5,40,42.5,45,50,55,60,70,85,100μmol/L的溶液；

S5.專一性檢測的探針制備

將咖啡酸乙酯溶于DMF/H₂O緩沖溶液配制成10μmol/L的溶液，同樣將各種干擾性離子溶于蒸餾水中配成濃度為40μmol/L的溶液。

3.根據權利要求2所述的一種反應型咖啡酰基水合肼分子熒光探針及其制備方法，其特征在于：所述S1制備過程中加熱回流具體為在70℃下回流4h。

4.根據權利要求2所述的一種反應型咖啡酰基水合肼分子熒光探針及其制備方法與應用，其特征在于：所述S3中粗產物通過硅膠色譜柱層析分離，回收溶劑后得到黃色固體產物。

5.一種反應型咖啡酰基水合肼分子熒光探針應用，其特征在于，具體包括以下應用：

a.靈敏性探針應用

采用標準熒光光譜滴定法在熒光分光光度計上測得不同濃度的水合肼分子對咖啡酸乙酯的熒光發射光譜；

b.專一性探針應用

采用標準熒光光譜滴定法在熒光分光光度計上分別測得不同的陰陽離子和水合肼分子加入前后對咖啡酸乙酯的熒光發射光譜；

c.化合物試紙應用

將直徑為4cm的圓形濾紙放在10μmol/L的探針溶液中浸泡2min取出，自然風干后拍照，在應用時隨著N₂H₄濃度的增加，負載化合物的濾紙熒光顏色逐漸由藍色變為藍綠色。

6.根據權利要求5所述的一種反應型咖啡酰基水合肼分子熒光探針及其制備方法與應用，其特征在于：所述通過對滴入不同濃度水合肼以及不同陰陽離子后熒光光譜的分析得到探針可用于N₂H₄的低靈敏度、專一性檢測。