[發明專利]一種細胞骨架實驗樣品的快速制備方法在審
| 申請號： | 202211058297.8 | 申請日： | 2022-08-30 |
| 公開（公告）號： | CN115524185A | 公開（公告）日： | 2022-12-27 |
| 發明（設計）人： | 馮世坤;周瑞芝;李慧 | 申請（專利權）人： | 河南師范大學 |
| 主分類號： | G01N1/28 | 分類號： | G01N1/28;G01N1/30;G01N1/34;G01N1/44 |
| 代理公司： | 新鄉市平原智匯知識產權代理事務所(普通合伙) 41139 | 代理人： | 郝懷慶 |
| 地址： | 453007 河*** | 國省代碼： | 河南;41 |
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| 摘要： | |||
| 搜索關鍵詞： | 一種 細胞骨架 實驗 樣品 快速 制備 方法 | ||
1.一種細胞骨架實驗樣品的快速制備方法，其特征在于具體步驟為：
步驟S1，撕取洋蔥鱗莖內表皮置于正方體塑料盒中，加入0.2mol/L的磷酸鹽緩沖液，待洋蔥鱗莖內表皮下沉后，置于微波爐中于30-40℃加熱處理2min；
步驟S2，吸去磷酸緩沖液，加入抽提劑1wt% Triton X-100溶液覆蓋洋蔥樣品，置于微波爐中于30-40℃加熱處理5min；
步驟S3，吸去抽提劑，用M-緩沖液浸泡洗滌3次，每次均置于微波爐中于30-40℃加熱處理2min，其中M-緩沖液由50mmol/L咪唑、50mmol/L氯化鉀、0.5mmol/L氯化鎂、1mmol/LEGTA、0.1mmol/L乙二胺四乙酸和1mmol/L β-巰基乙醇組成；
步驟S4，吸去M-緩沖液，加入固定液3wt%戊二醛溶液覆蓋洋蔥樣品，置于微波爐中于30-40℃加熱處理5min；
步驟S5，吸去固定液，用磷酸鹽緩沖液浸泡洗滌3次，每次均置于微波爐中于30-40℃加熱處理2min；
步驟S6，吸去磷酸鹽緩沖液，加0.2wt%考馬斯亮藍R250染液置于微波爐中于30-40℃加熱處理3min；
步驟S7，用蒸餾水沖洗1-2次去除浮液，加蓋玻片觀察。
2.根據權利要求1所述的細胞骨架實驗樣品的快速制備方法，其特征在于：步驟S2中所述抽提劑1wt% Triton X-100溶液由M-緩沖液配制。
3.根據權利要求1所述的細胞骨架實驗樣品的快速制備方法，其特征在于：步驟S4中所述固定液3wt%戊二醛溶液由磷酸鹽緩沖液配制。
4.根據權利要求1所述的細胞骨架實驗樣品的快速制備方法，其特征在于步驟S6中所述0.2wt%考馬斯亮藍R250染液的溶劑由以下體積百分含量的溶液組成：甲醇46.5%、冰醋酸7%和蒸餾水46.5%。
5.根據權利要求1所述的細胞骨架實驗樣品的快速制備方法，其特征在于：每個步驟中的樣品在微波爐中處理時需要置于盛滿水的燒杯中，每次處理結束后要及時更換燒杯中的水以避免燒杯中水的溫度超過40℃。
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