[發(fā)明專利]一種清淋顆粒HPLC特征圖譜構(gòu)建方法

在審

• 申請(qǐng)?zhí)枺?/td>: 202211052059.6
• 申請(qǐng)日: 2022-08-31
• 公開(kāi)（公告）號(hào): CN115469028A
• 公開(kāi)（公告）日: 2022-12-13
• 發(fā)明（設(shè)計(jì)）人: 展月;趙俞;鄢必新;郭文英;王鑫;祁樹(shù)賢;李敏;倫宗慧;秦思蓮
• 申請(qǐng)（專利權(quán)）人: 修正藥業(yè)集團(tuán)股份有限公司;吉林修正藥業(yè)新藥開(kāi)發(fā)有限公司
• 主分類號(hào): G01N30/02
• 分類號(hào): G01N30/02;G01N30/06;G01N30/34;G01N30/74;G01N30/86
• 代理公司: 北京集佳知識(shí)產(chǎn)權(quán)代理有限公司 11227
• 代理人: 王洋

本發(fā)明提供了一種清淋顆粒HPLC特征圖譜構(gòu)建方法，包括：A)將清淋顆粒采用溶劑溶解，得到待測(cè)液；B)將待測(cè)液采用高效液相色譜法測(cè)定，得到清淋顆粒的HPLC特征圖譜；所述高效液相色譜法色譜條件為：色譜柱為C18柱；流動(dòng)相A為乙腈，流動(dòng)相B為0.2％磷酸，梯度洗脫。本發(fā)明采用高效液相色譜法，選用乙腈?0.2％磷酸為流動(dòng)相進(jìn)行梯度洗脫，以梔子苷、京尼平苷為參照物，建立了清淋顆粒HPLC特征圖譜。建立了10批清淋顆粒HPLC特征圖譜，確定了9個(gè)特征峰，建立了清淋顆粒標(biāo)準(zhǔn)特征圖譜。本發(fā)明具有方便、快捷、穩(wěn)定、精密度高、重現(xiàn)性好等特點(diǎn)，可有效控制清淋顆粒質(zhì)量。

技術(shù)領(lǐng)域

本發(fā)明涉及分析檢測(cè)技術(shù)領(lǐng)域，尤其是涉及一種清淋顆粒HPLC特征圖譜構(gòu)建方法。

背景技術(shù)

清淋顆粒由瞿麥、萹蓄、木通、鹽車前子、滑石、梔子、大黃、炙甘草八味藥材組成。標(biāo)準(zhǔn)收載于2020年版《中國(guó)藥典》。本品質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)中包括顆粒的性狀；大黃、梔子的薄層鑒別；梔子苷的含量測(cè)定。其質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)只控制一味藥的定性定量檢測(cè)方法，難以整體全面的控制產(chǎn)品質(zhì)量。

因此，有必要建立一種清淋顆粒HPLC特征圖譜構(gòu)建方法，為有效控制和較全面評(píng)價(jià)清淋顆粒的質(zhì)量提供依據(jù)。

發(fā)明內(nèi)容

有鑒于此，本發(fā)明要解決的技術(shù)問(wèn)題在于提供一種清淋顆粒HPLC特征圖譜構(gòu)建方法，本發(fā)明構(gòu)建的清淋顆粒HPLC特征圖譜方法穩(wěn)定，可靠，可以對(duì)清淋顆粒的質(zhì)量進(jìn)行控制。

本發(fā)明提供了一種清淋顆粒HPLC特征圖譜構(gòu)建方法，包括：

A)將清淋顆粒采用溶劑溶解，得到待測(cè)液；

B)將待測(cè)液采用高效液相色譜法測(cè)定，得到清淋顆粒的HPLC特征圖譜；

所述高效液相色譜法色譜條件為：色譜柱為C18柱；流動(dòng)相A為乙腈，流動(dòng)相B為0.2％磷酸，梯度洗脫。

優(yōu)選的，還包括制備參照物溶液：分別取梔子苷、京尼平苷，采用甲醇溶解，得到參照物溶液；

將所述參照物溶液采用高效液相色譜法測(cè)定，得到參照物的色譜圖；并根據(jù)參照物的色譜圖對(duì)清淋顆粒HPLC特征圖譜的成分進(jìn)行定性測(cè)定。

優(yōu)選的，所述梯度洗脫具體為：

0～10min，A相：5％、B相：95％；

10～15min，A相：5％～10％、B相：95％～90％；

15～45min，A相：10％～20％、B相：90％～80％；

45～50min，A相：20％～25％、B相：80％～75％；

50～60min，A相：25％～30％、B相：75％～70％。

優(yōu)選的，所述色譜柱為Agilent ZORBAX SB-C18，規(guī)格為5μm，4.6×250mm；柱溫30℃～40℃。

優(yōu)選的，所述流動(dòng)相流速為0.9～1.1mL/min；檢測(cè)波長(zhǎng)為235～245nm；進(jìn)樣量為10～20μL；理論塔板數(shù)按芍藥苷峰計(jì)算應(yīng)不低于3000。

優(yōu)選的，所述流動(dòng)相流速為1.0mL/min；檢測(cè)波長(zhǎng)為240nm；進(jìn)樣量為10μL；

所述參照物溶液中，梔子苷的濃度為100μg/mL；京尼平苷的濃度為100μg/mL。

優(yōu)選的，采用中藥色譜指紋圖譜相似度評(píng)價(jià)系統(tǒng)對(duì)清淋顆粒HPLC特征圖譜的相似度進(jìn)行評(píng)價(jià)，得到由9個(gè)特征峰構(gòu)成的清淋顆粒HPLC標(biāo)準(zhǔn)特征圖譜，其中第3號(hào)峰為梔子苷峰，第8號(hào)峰為京尼平苷峰；對(duì)9個(gè)特征峰進(jìn)行歸屬：1、2、4號(hào)特征峰歸屬為炙甘草藥材，3、5號(hào)特征峰歸屬為梔子藥材，6、7號(hào)特征峰歸屬為大黃藥材，8、9號(hào)特征峰歸屬為鹽車前子藥材。