[發明專利]一種檢測人類β-地中海貧血基因分型的核酸組合及試劑盒與應用

在審

• 申請號: 202211049795.6
• 申請日: 2022-08-30
• 公開（公告）號: CN116064769A
• 公開（公告）日: 2023-05-05
• 發明（設計）人: 董瑞華;馬霜;趙艷蘋;汪再興
• 申請（專利權）人: 武漢友芝友醫療科技股份有限公司
• 主分類號: C12Q1/6883
• 分類號: C12Q1/6883;C12N15/11
• 代理公司: 北京超凡宏宇專利代理事務所(特殊普通合伙) 11463
• 代理人: 任燕妮

1.一種檢測人類β-地中海貧血基因分型的核酸組合，其特征在于，所述試劑盒中包括用于檢測β-globin基因-29、CD14/15、CD17、CD26、CD27/28和IVS1-1位點的探針；

所述探針的核苷酸序列如SEQ?ID?NO.21、SEQ?ID?NO.22、SEQ?ID?NO.29、SEQ?IDNO.30、SEQ?ID?NO.31、SEQ?ID?NO.32、SEQ?ID?NO.34、SEQ?ID?NO.36和SEQ?ID?NO.37所示。

2.根據權利要求1所述的核酸組合，其特征在于，所述核酸組合中還包括用于檢測-32、-30、-29、-28、CD+40/43、Int、CD14/15、CD17、CD26、CD27/28、IVS1-1、IVS1-5、CD31、CD41/42、CD43、CD71/72和IVS-II-654相關位點的引物和探針；

所述引物的核苷酸序列如SEQ?ID?NO.1-SEQ?ID?NO.17所示，所述探針如SEQ?IDNO.18-SEQ?ID?NO.20、SEQ?ID?NO.23-SEQ?ID?NO.28、SEQ?ID?NO.35和SEQ?ID?NO.38-SEQID?NO.46所示。

3.根據權利要求1或2所述的核酸組合，其特征在于，所述探針的5'端分別修飾不同的熒光基團，3'端分別修飾不同的淬滅基團；

優選地，所述核苷酸序列為SEQ?ID?NO.18-SEQ?ID?NO.46的探針的5’端的熒光報告基團選自FAM、VIC、HEX、ROX、NED、Texas?red、CY3、CY5等熒光報告基團中的任意一種或幾種；

優選地，所述核苷酸序列為SEQ?ID?NO.18-SEQ?ID?NO.46的探針的3’端修飾的熒光淬滅基團選自TAMARA、BHQ1、BHQ2、MGB等熒光淬滅基團中的任意一種或幾種。

4.如權利要求3所述的核酸組合在制備檢測人類β-地中海貧血基因分型產品中的應用。

5.一種檢測人類β-地中海貧血基因分型的試劑盒，其特征在于，其包括檢測β-地中海貧血基因17個位點的8組檢測物，所述8組檢測物來源于權利要求1-3任一項所述的核酸組合；

所述8組檢測物分別為：

第一檢測物：用于檢測-32、-30、-28位點，其包括SEQ?ID?NO.1、SEQ?ID?NO.2、SEQ?IDNO.18、SEQ?ID?NO.19、SEQ?ID?NO.20以及SEQ?ID?NO.21所示的核苷酸序列；

第二檢測物：用于檢測CD17、-29位點，其包括SEQ?ID?NO.1、SEQ?ID?NO.2、SEQ?IDNO.3、SEQ?ID?NO.4、SEQ?ID?NO.22、SEQ?ID?NO.23、SEQ?ID?NO.24以及SEQ?ID?NO.21所示的核苷酸序列；

第三檢測物：用于檢測CD+40/43、Int位點，其包括SEQ?ID?NO.5、SEQ?ID?NO.6、SEQ?IDNO.25、SEQ?ID?NO.26、SEQ?ID?NO.27以及SEQ?ID?NO.28所示的核苷酸序列；

第四檢測物：用于檢測CD27/28、CD14/15位點，其包括SEQ?ID?NO.3、SEQ?ID?NO.4、SEQID?NO.7、SEQ?ID?NO.8、SEQ?ID?NO.29、SEQ?ID?NO.30、SEQ?ID?NO.31以及SEQ?ID?NO.32所示的核苷酸序列；

第五檢測物：用于檢測IVS1-1、IVS1-5位點，其包括SEQ?ID?NO.3、SEQ?ID?NO.9、SEQ?IDNO.33、SEQ?ID?NO.34以及SEQ?ID?NO.35所示的核苷酸序列；

第六檢測物：用于檢測CD26、CD31位點，其包括SEQ?ID?NO.7、SEQ?ID?NO.8、SEQ?IDNO.10、SEQ?ID?NO.11、SEQ?ID?NO.36、SEQ?ID?NO.37、SEQ?ID?NO.38以及SEQ?ID?NO.39所示的核苷酸序列；

第七檢測物：用于檢測CD41/42、CD43位點，其包括SEQ?ID?NO.12、SEQ?ID?NO.13、SEQID?NO.40、SEQ?ID?NO.41以及SEQ?ID?NO.42所示的核苷酸序列；

第八檢測物：用于檢測CD71/72、IVS-II-654位點，其包括SEQ?ID?NO.14、SEQ?IDNO.15、SEQ?ID?NO.16、SEQ?ID?NO.17、SEQ?ID?NO.43、SEQ?ID?NO.44、SEQ?ID?NO.45以及SEQID?NO.46所示的核苷酸序列。