[發(fā)明專利]一種原發(fā)性中樞神經(jīng)系統(tǒng)淋巴瘤小鼠模型的構(gòu)建與應(yīng)用

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• 申請?zhí)枺?/td>: 202211046063.1
• 申請日: 2022-08-30
• 公開（公告）號: CN115281153A
• 公開（公告）日: 2022-11-04
• 發(fā)明（設(shè)計）人: 李曉曦;鄧民謠;魏莊;湯化
• 申請（專利權(quán)）人: 上海米地生物醫(yī)藥有限公司
• 主分類號: A01K67/027
• 分類號: A01K67/027;A61D7/00
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• 代理人: 暫無信息

本發(fā)明屬于轉(zhuǎn)化醫(yī)學(xué)和新藥開發(fā)領(lǐng)域，具體涉及一種原發(fā)性中樞神經(jīng)系統(tǒng)淋巴瘤小鼠模型的構(gòu)建與應(yīng)用。本發(fā)明公開了一種原發(fā)性中樞神經(jīng)系統(tǒng)淋巴瘤小鼠模型的構(gòu)建方法；公開了一株用于構(gòu)建原發(fā)性中樞神經(jīng)系統(tǒng)淋巴瘤小鼠模型的細(xì)胞株；公開了原發(fā)性中樞神經(jīng)系統(tǒng)淋巴瘤小鼠模型的腫瘤發(fā)生特點。本發(fā)明構(gòu)建獲得了原發(fā)性中樞神經(jīng)系統(tǒng)淋巴瘤小鼠模型，該小鼠模型中淋巴瘤發(fā)展迅速，主要表現(xiàn)為腦侵犯等，與人類原發(fā)性中樞神經(jīng)系統(tǒng)淋巴瘤的侵襲特征高度相似，是開展小分子抗癌藥物、抗體療法、細(xì)胞療法的理想體內(nèi)藥效評價動物模型，也可用于淋巴瘤侵犯腦的分子機(jī)制研究。

技術(shù)領(lǐng)域

本發(fā)明屬于轉(zhuǎn)化醫(yī)學(xué)和新藥開發(fā)領(lǐng)域，具體涉及一種原發(fā)性中樞神經(jīng)系統(tǒng)淋巴瘤小鼠模型的構(gòu)建與應(yīng)用。

背景技術(shù)

彌漫大B細(xì)胞淋巴瘤(DLBCL)是最常見的一種非霍奇金淋巴瘤，發(fā)病率約占30％。由于彌漫大B細(xì)胞淋巴瘤(DLBCL)是一種高度異質(zhì)的淋巴瘤，在淋巴瘤發(fā)生特征與藥物應(yīng)答方面具有非常大的異質(zhì)性，約40％的患者無法從標(biāo)準(zhǔn)化療方案R-CHOP中獲益。在這些復(fù)發(fā)難治的患者中，淋巴瘤侵犯中樞神經(jīng)系統(tǒng)如腦和脊柱，包括原發(fā)性中樞神經(jīng)系統(tǒng)淋巴瘤和繼發(fā)性中樞神經(jīng)系統(tǒng)淋巴瘤，被認(rèn)為是這些患者無法從化療中獲益的主要原因。多年來臨床上嘗試采用鞘內(nèi)注射高劑量MTX或Ara-C或其他臨床試驗藥物對PCNSL和SCNSL 進(jìn)行預(yù)防和治療，尚未取得理想的治療效果。

缺乏理想的原發(fā)性中樞神經(jīng)系統(tǒng)淋巴瘤的實驗動物模型，是開展原發(fā)性中樞神經(jīng)系統(tǒng)淋巴瘤分子機(jī)制探究和藥物開發(fā)的主要限制因素。本發(fā)明中篩選獲得了一株小鼠B淋巴瘤細(xì)胞來源的細(xì)胞株MA-2，采用該細(xì)胞株經(jīng)尾靜脈注射構(gòu)建淋巴瘤重構(gòu)模型，可以快速獲得侵犯腦特征的淋巴瘤小鼠模型，是開展原發(fā)性中樞神經(jīng)系統(tǒng)淋巴瘤分子機(jī)制探究和藥物開發(fā)的理想動物模型。該小鼠模型發(fā)病時間短，腦侵犯特征一致性高，與人類原發(fā)性中樞神經(jīng)系統(tǒng)淋巴瘤的腦侵犯特征非常相似，是小分子抗癌藥物、抗體療法、細(xì)胞療法的理想體內(nèi)藥效評價動物模型，也可用于淋巴瘤侵犯腦的分子機(jī)制研究。

發(fā)明內(nèi)容

為了克服現(xiàn)有技術(shù)中所存在的問題，本發(fā)明的目的在于提供一種原發(fā)性中樞神經(jīng)系統(tǒng)淋巴瘤小鼠模型的構(gòu)建與應(yīng)用，所述原發(fā)性中樞神經(jīng)系統(tǒng)淋巴瘤小鼠模型可用于新藥開發(fā)過程中的臨床前動物體內(nèi)藥效分析。

為了實現(xiàn)上述目的以及其他相關(guān)目的，本發(fā)明采用如下技術(shù)方案：

本發(fā)明的第一方面，提供一種原發(fā)性中樞神經(jīng)系統(tǒng)淋巴瘤小鼠模型的構(gòu)建方法，包括如下步驟：(1)采用連續(xù)移植實驗分析MA細(xì)胞系(遺傳背景為Eμ-Myc；Cdkn2a^Arf-/-)來源的原代細(xì)胞株的成瘤特征，篩選獲得傾向于侵犯腦的細(xì)胞株MA-2；(2)將細(xì)胞株MA-2 通過尾靜脈注射方式移植入受體小鼠內(nèi)；(3)受體小鼠在接收移植后20天左右出現(xiàn)腦侵犯等表型，即獲得原發(fā)性中樞神經(jīng)系統(tǒng)淋巴瘤小鼠模型。

在一種實施方式中，所述原發(fā)性中樞神經(jīng)系統(tǒng)淋巴瘤小鼠模型的淋巴瘤侵犯到中樞神經(jīng)系統(tǒng)包括腦和脊髓。

本發(fā)明的第二方面，提供前述構(gòu)建方法獲得的傾向于侵犯腦的細(xì)胞株MA-2。

本發(fā)明的第三方面，提供前述構(gòu)建方法獲得的原發(fā)性中樞神經(jīng)系統(tǒng)淋巴瘤小鼠模型。

本發(fā)明的第四方面，提供前述構(gòu)建方法獲得的原發(fā)性中樞神經(jīng)系統(tǒng)淋巴瘤小鼠模型用于開展原發(fā)性中樞神經(jīng)系統(tǒng)淋巴瘤治療藥物和療法的體內(nèi)藥效評價的用途。

本發(fā)明的第五方面，提供一種開展原發(fā)性中樞神經(jīng)系統(tǒng)淋巴瘤治療藥物和療法的體內(nèi)藥效評價的方法，包括步驟：將候選藥物或療法施用于前述構(gòu)建方法獲得的原發(fā)性中樞神經(jīng)系統(tǒng)淋巴瘤小鼠模型，若淋巴瘤消退或減緩生長，則表明該藥物或療法有效，可將該候選藥物或療法確定為原發(fā)性中樞神經(jīng)系統(tǒng)淋巴瘤的候選治療藥物或療法。

本發(fā)明的第六方面，提供前述構(gòu)建方法獲得的原發(fā)性中樞神經(jīng)系統(tǒng)淋巴瘤小鼠模型用于開展原發(fā)性中樞神經(jīng)系統(tǒng)淋巴瘤發(fā)生的分子機(jī)制研究。

與現(xiàn)有技術(shù)相比，本發(fā)明具有如下有益效果：