[發明專利]一種改良民豬肉質的ACSL1分子標記及其應用

有效

• 申請號: 202211045783.6
• 申請日: 2022-08-30
• 公開（公告）號: CN116004845B
• 公開（公告）日: 2023-10-17
• 發明（設計）人: 劉娣;龐宇;張冬杰;李忠秋;馬紅;楊秀芹
• 申請（專利權）人: 黑龍江省農業科學院畜牧研究所
• 主分類號: C12Q1/6888
• 分類號: C12Q1/6888;C12N15/11
• 代理公司: 哈爾濱市松花江專利商標事務所 23109
• 代理人: 李紅媛

一種改良民豬肉質的ACSL1分子標記及其應用，它涉及分子遺傳學領域，本發明發現民豬ACSL1基因5′調控區存在著兩個突變位點，其中－517位點存在著G到T的突變，通過熒光素酶報告基因檢測系統發現，將－517位點G突變成T導致ACSL1啟動子活性顯著降低，與肉質差的豬只ACSL1基因mRNA表達量水平低相一致。可見通過檢測豬基因組中ACSL1調控區該位點的基因型可以作為與民豬肉質相關的分子標記，不僅方法簡便快速，而且不受環境影響，并可實現早期選種。

技術領域

本發明涉及分子遺傳學領域，具體涉及了一種改良民豬肉質的ACSL1分子標記及其應用，通過判斷豬ACSL1基因5′調控區突變位點的多態性來進行選種，并人為地應用該突變位點實現民豬肉質改良。

背景技術

我國是養豬大國，年均豬肉產量和消費量均達到世界總量的50％以上，在我國居民的肉食結構中，豬肉約占肉類消費總量的50～60％。隨著生活水平的提高，人們對肉質的要求越來越高，風味、嫩度、多汁性等感官品質逐漸成為影響消費者購買豬肉的主要因素。為了滿足新時期的消費者需求，豬肉品質改良在豬育種目標中所占的比重不斷提高，培育肉質優良的新品種(品系)豬是當前廣大養豬生產者和科研工作者的主要任務之一。

肉質是復雜的經濟性狀，總體遺傳力較低，并且和生長速度、瘦肉率等性狀存在著一定程度的負相關，通過傳統手段選育難以達到理想效果，分子遺傳學和基因工程技術的發展，為通過分子標記輔助選擇提高豬肉質提供了有力工具。肌內脂肪含量與肉的嫩度、多汁性和風味呈正相關，直接決定著肉質優劣。民豬是我國優良的地方品種資源，具有肉質鮮美、抗寒、抗逆、耐粗飼等優良特性，遺傳多樣性豐富，是研究肉質形成機制的良好素材。明確民豬肉質優良的形成機制，選擇理想基因型的民豬個體作為親本培育具有民豬血緣的雜交后代，可以有效提高豬肉品質。但是目前缺乏民豬的豬肉品質(尤其是肌內脂肪含量)改良育種方法。

發明內容

為了解決上述問題，本發明提供了一種改良民豬肉質的ACSL1分子標記及其應用和育種方法，本發明通過篩選出民豬ACSL1基因分子標記，建立豬分子標記輔助育種方法，為民豬肉質遺傳改良提供基因標記和技術方法。

本發明的一種改良民豬肉質的ACSL1分子標記，所述的ACSL1分子標記的核苷酸序列如序列表SEQ?ID?NO:1所示，所述的ACSL1分子標記的第－517位核苷酸存在G/T多態性位點。

基于所述的ACSL1分子標記開發的檢測方法為PCR產物直接測序法。

一種改良民豬肉質的ACSL1分子標記在改良豬肉質的育種中的應用。

本發明的一種應用所述的改良民豬肉質的ACSL1分子標記選育/輔助選育豬肉肌內脂肪含量的豬品種或品系的方法，具體方法如下：

一、獲得待檢測豬的基因組DNA；

二、以上述豬基因組DNA為模板，采用如下引物對進行PCR擴增，獲得含有－517位點的ACSL1基因的5′調控區片段；

引物ACSL1_F：5′-TAGCCCTCAAAACCGCACC-3′；

引物ACSL1_R：5′-AGCACTCACCTCCTCCGCAG-3′；

三、通過瓊脂糖凝膠電泳對上述擴增產物進行檢測；

四、對PCR產物進行測序分析；

五、選擇ACSL1基因的5′調控區內－517位點的基因為G的豬，即為篩選出的目標；

六、對篩選出的目標豬進行育種，即完成所述的選育/輔助選育豬肉肌內脂肪含量的豬品種或品系的方法。

用于檢測所述的ACSL1分子標記的引物對，所述的引物序列如下所示：

引物ACSL1_F：5′-TAGCCCTCAAAACCGCACC-3′；