[發明專利]一種改良民豬肉質的ACSL1分子標記及其應用有效
| 申請號： | 202211045783.6 | 申請日： | 2022-08-30 |
| 公開（公告）號： | CN116004845B | 公開（公告）日： | 2023-10-17 |
| 發明（設計）人： | 劉娣;龐宇;張冬杰;李忠秋;馬紅;楊秀芹 | 申請（專利權）人： | 黑龍江省農業科學院畜牧研究所 |
| 主分類號： | C12Q1/6888 | 分類號： | C12Q1/6888;C12N15/11 |
| 代理公司： | 哈爾濱市松花江專利商標事務所 23109 | 代理人： | 李紅媛 |
| 地址： | 150086 黑龍*** | 國省代碼： | 黑龍江;23 |
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| 摘要： | |||
| 搜索關鍵詞： | 一種 良民 豬肉 acsl1 分子 標記 及其 應用 | ||
1.一種改良民豬肉質的ACSL1分子標記，其特征在于：所述的ACSL1分子標記的核苷酸序列如序列表SEQ?ID?NO:1所示，所述的ACSL1分子標記的第－517位核苷酸存在G/T多態性位點。
2.基于權利要求1所述的ACSL1分子標記開發的檢測方法為PCR產物直接測序法。
3.如權利要求1所述的一種改良民豬肉質的ACSL1分子標記在改良民豬肉質的育種中的應用。
4.根據權利要求3所述的應用，其特征在于：所述的改良民豬肉質為改良民豬肌內脂肪含量。
5.根據權利要求3所述的應用，其特征在于：改良民豬肉質的ACSL1分子標記用于豬的早期選種。
6.一種應用權利要求1所述的改良民豬肉質的ACSL1分子標記選育/輔助選育豬肉肌內脂肪含量的豬品種或品系的方法，其特征在于，具體方法如下：
一、獲得待檢測豬的基因組DNA；
二、以上述豬基因組DNA為模板，采用如下引物對進行PCR擴增，獲得含有－517位點的ACSL1基因的5′調控區片段；
引物ACSL1_F：5′-TAGCCCTCAAAACCGCACC-3′；
引物ACSL1_R：5′-AGCACTCACCTCCTCCGCAG-3′；
三、通過瓊脂糖凝膠電泳對上述擴增產物進行檢測；
四、對PCR產物進行測序分析；
五、選擇ACSL1基因的5′調控區內－517位點的基因為G的豬，即為篩選出的目標；
六、對篩選出的目標豬進行育種，即完成所述的選育/輔助選育豬肉肌內脂肪含量的豬品種或品系的方法。
7.根據權利要求6所述的選育/輔助選育豬肉肌內脂肪含量的豬品種或品系的方法，其特征在于：所述的含有－517位點的ACSL1基因的5′調控區片段的核苷酸序列如SEQ?ID?NO:1所示。
8.根據權利要求6所述的選育/輔助選育豬肉肌內脂肪含量的豬品種或品系的方法，其特征在于：PCR擴增體系為：基因組DNA?25ng，10×緩沖溶液2.5μL，2.5mM的dNTP混合液2μL，上下游引物各10pmol，高保真DNA聚合酶1U，ddH2O補齊至25μL；
PCR擴增程序為：95℃預變性5min；94℃變性30s，63℃退火30s，72℃延伸1min，30個循環；72℃終延伸5min；4℃保存。
9.用于檢測權利要求1所述的ACSL1分子標記的引物對，其特征在于：所述的引物序列如下所示：
引物ACSL1_F：5′-TAGCCCTCAAAACCGCACC-3′；
引物ACSL1_R：5′-AGCACTCACCTCCTCCGCAG-3′。
10.一種用于檢測權利要求1所述的ACSL1分子標記的試劑盒，其特征在于：包括如權利要求9所述的引物對。
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