[發明專利]一種延緩烏菜組培苗繼代生長速率的方法

有效

• 申請號: 202211041248.3
• 申請日: 2022-08-29
• 公開（公告）號: CN115380823B
• 公開（公告）日: 2023-05-19
• 發明（設計）人: 袁凌云;張利婷;汪承剛;朱世東;趙冠艷;黃興學;單國雷;侯金鋒;陳國戶;唐小燕;張澤根
• 申請（專利權）人: 安徽農業大學;安徽省皖江蔬菜產業技術研究院有限責任公司
• 主分類號: A01H4/00
• 分類號: A01H4/00;A01G7/04
• 代理公司: 合肥興東知識產權代理有限公司 34148
• 代理人: 葉曼

1.一種延緩烏菜組培苗繼代生長速率的方法，其特征在于，包括如下步驟：

（1）外植體的選擇

將烏菜嫩葉葉柄剪切成葉柄段后清洗干凈；

（2）外植體的消毒

將清洗干凈的烏菜嫩葉葉柄段置于無菌環境中進行消毒；

（3）誘導培養

將無菌的烏菜嫩葉葉柄段切成葉柄塊，再接種到誘導培養基上進行愈傷組織的誘導培養；誘導培養基的配方為：MS+30g/L蔗糖+5.5g/L瓊脂，pH?5.8~6.0；誘導培養條件為：培養溫度25℃，光質為熒光燈，光照時間為14h晝/10h夜、光照強度70μmol/(m²·s)；

（4）繼代培養

將培養出的愈傷組織轉接到繼代培養基上進行繼代培養；同時，在所述繼代培養基中添加50~200mg/kg?TIBA，控制培養溫度為10~18℃，調整光質為紅藍復合光，且紅/藍光比例為1:3或1:1，控制光照強度為10~70μmol/(m²·s)，控制光照時間為光照1天/黑暗1~3天；其中，未添加TIBA的繼代培養基配方為：MS+30g/L蔗糖+5.5g/L瓊脂，pH?5.8~6.0。

2.根據權利要求1所述的延緩烏菜組培苗繼代生長速率的方法，其特征在于，所述步驟（1）中，將從田間采回來的烏菜嫩葉葉柄剪切成葉柄段后放到廣口瓶中，先利用流水沖洗20min，接著再采用0.05%安利洗滌液振蕩洗滌10min，再用自來水洗至完全沒有泡沫時，視為清洗干凈。

3.根據權利要求1所述的延緩烏菜組培苗繼代生長速率的方法，其特征在于，所述步驟（2）中，將清洗干凈的烏菜嫩葉葉柄段移至超凈工作臺后，先用無菌水洗滌4次，再倒入70%~75%乙醇滅菌10s，用無菌水洗滌2~3次，用0.1%?HgCl₂溶液振蕩滅菌30s，接著用無菌水振蕩洗滌6次。

4.根據權利要求1所述的延緩烏菜組培苗繼代生長速率的方法，其特征在于，所述步驟（3）中，將無菌的烏菜嫩葉葉柄段切成0.2cm大小的葉柄塊，再接種到誘導培養基上進行愈傷組織的誘導培養。

5.根據權利要求1所述的延緩烏菜組培苗繼代生長速率的方法，其特征在于，所述步驟（4）中，繼代培養基中添加的TIBA濃度具體為100mg/kg。

6.根據權利要求1所述的延緩烏菜組培苗繼代生長速率的方法，其特征在于，所述步驟（4）中，繼代培養溫度具體為18℃。

7.根據權利要求1所述的延緩烏菜組培苗繼代生長速率的方法，其特征在于，所述步驟（4）中，紅藍復合光的紅/藍光比例具體為1:3，且光照強度為70μmol/(m²·s)。

8.根據權利要求1所述的延緩烏菜組培苗繼代生長速率的方法，其特征在于，所述步驟（4）中，紅藍復合光的光照時間具體為光照1天/黑暗2天。