[發明專利]一種延緩烏菜組培苗繼代生長速率的方法

有效

• 申請號: 202211041248.3
• 申請日: 2022-08-29
• 公開（公告）號: CN115380823B
• 公開（公告）日: 2023-05-19
• 發明（設計）人: 袁凌云;張利婷;汪承剛;朱世東;趙冠艷;黃興學;單國雷;侯金鋒;陳國戶;唐小燕;張澤根
• 申請（專利權）人: 安徽農業大學;安徽省皖江蔬菜產業技術研究院有限責任公司
• 主分類號: A01H4/00
• 分類號: A01H4/00;A01G7/04
• 代理公司: 合肥興東知識產權代理有限公司 34148
• 代理人: 葉曼

本發明提供了一種延緩烏菜組培苗繼代生長速率的方法，包括如下步驟：將烏菜嫩葉葉柄剪切成葉柄段后清洗干凈；將葉柄段置于無菌環境中消毒；將無菌的烏菜嫩葉葉柄段切成葉柄塊，再接種到誘導培養基上誘導培養；將愈傷組織轉到繼代培養基上繼代培養；同時，在繼代培養基中添加50～200mg/kg?TIBA，控制培養溫度為10～18℃，調整光質為紅藍復合光，且紅/藍光比例為1:3、1:1，控制光照強度為10～70μmol/(m²·s)，控制光照時間為光照1天/黑暗1～3天。本發明通過將紅藍光間歇光照、低溫培養和添加TIBA方法相結合，獲得一種能有效延緩烏菜組培苗繼代生長速率的新方法。

技術領域

本發明涉及生物技術領域，尤其涉及一種延緩烏菜組培苗繼代生長速率的方法。

背景技術

烏菜又名塌菜、塌棵菜、塌地松、黑菜，為十字花科蕓苔屬蕓苔種白菜亞種的一個變種；其基生葉少，密生，短且寬，顯著皺縮，圓卵形或倒卵形；其以葉片供食，原產中國，主要分布在長江流域。烏菜的葉片肥嫩，可炒食、作湯、涼拌，色美味鮮，營養豐富。

植物組織培養，又稱植物離體培養，是指在無菌和人工控制的環境條件下，利用適當的培養基，對離體的植物器官、組織、細胞及原生質體進行培養，使其再生細胞或完整植株的技術。利用植物組織培養技術培育烏菜，不但能保證烏菜品系的純度，還能大大地提高繁殖系數，縮短出圃周期，更有利于烏菜生產良種的推廣應用。因此，植物組織培養技術成為烏菜商品化生產的最佳選擇。

然而，在烏菜的工廠化組培過程中發現：當需要轉瓶轉苗時，出于人工勞動力不足或者田地數量有限的原因，往往無法在短時內將全部烏菜苗都移栽到田地里，造成適齡苗因無法下地而產生浪費，帶來經濟損失。據此，需要提出一種能有效延緩烏菜組培苗繼代生長速率的方法，從而有效控制適齡苗的下地時間。

光質、光強、光照時間等是影響植物生長發育的重要環境因子。研究表明，不同的光質條件對植物生長發育的各個階段發揮重要的調控作用。發光二極管(LED)能發出精準波譜的單色光，波長范圍較窄，且能通過調控裝置而控制光強。紅光能夠促進植株莖葉的徑向生長，有利于可溶性糖和淀粉的積累，降低色素含量。而藍光能夠逆轉此效應，促進色素和可溶性蛋白的合成且利于其莖葉的橫向生長，只在全紅光條件下植株不能正常生長。紅藍組合光有利于植株的生長，增強了光系統反應中心的開放程度與光能轉換效率。然而，目前的研究都集中于快繁體系相對成熟的物種，對于烏菜組織培養中尤其利用紅藍配比光照及時間來延緩組培繼代培養的應用尚未報道。

葉片是植物利用光能、合成有機化合物的重要場所，在植物生長發育過程中起著重要作用。葉片的衰老是個極其復雜的過程，它對葉菜類蔬菜的貨架期的延遲、組培苗移栽人工壓力的減小、組培苗單株優良性狀的保持均產生影響。低溫可以降低光合速率和呼吸速率，使植株生長延緩。

三碘苯甲酸(TIBA)是一種生長抑制劑，亦稱生長延緩劑，是指人工合成或天然的能阻礙整個植物或植物的某個特定器官生長的物質，是植物生長調節劑中的一種類型。TIBA在化學結構上和生長素類似，其主要是通過競爭性抑制產生與生長素相反的作用，有利于降低株高、減少倒伏，還具有抑制頂端生長的作用。

因此，若嘗試將紅藍光間歇光照、適度低溫和在培養基中添加TIBA方法相結合，并用于烏菜組培培養，將有望獲得一種能有效延緩烏菜組培苗繼代生長速率的新方法。

發明內容

本發明所要解決的技術問題在于提供一種同時使用紅藍光間歇光照、適度低溫和培養基添加TIBA方法來延緩烏菜組培苗繼代生長速率的方法。

本發明采用以下技術方案解決上述技術問題：

一種延緩烏菜組培苗繼代生長速率的方法，包括如下步驟：

(1)外植體的選擇

將烏菜嫩葉葉柄剪切成葉柄段后清洗干凈；

(2)外植體的消毒