[發明專利]一種環縮肽類化合物及其制備方法與應用

在審

• 申請號: 202211037105.5
• 申請日: 2022-08-26
• 公開（公告）號: CN115505033A
• 公開（公告）日: 2022-12-23
• 發明（設計）人: 章華偉;劉圓圓;邵益蘭;蔡悅;王鴻
• 申請（專利權）人: 浙江工業大學
• 主分類號: C07K11/02
• 分類號: C07K11/02;C12P21/04;C07K1/36;C07K1/34;C07K1/20;C07K1/14;A61K38/15;A61P35/00;C12R1/77
• 代理公司: 杭州天正專利事務所有限公司 33201
• 代理人: 李世玉

1.一種式(I)所示環縮肽類化合物：

2.一種權利要求1所述環縮肽類化合物的制備方法，其特征在于，所述方法按如下步驟進行：

(1)菌株發酵：將尖孢鐮刀菌(Fusarium oxysporum)CGMCC No.17763接至GPY培養基，在室溫下避光靜置發酵10-30天，獲得發酵混合物；所述GPY培養基組成：葡萄糖10g/L，蛋白胨5g/L，酵母提取物2g/L，L-色氨酸2g/L，海鹽2g/L，溶劑為水，pH 7.5；

(2)化合物提取：將步驟(1)制備的發酵混合物離心，取沉淀加入甲醇a后進行超聲輔助萃取，有機層減壓濃縮至無液體流出，得到粗提物浸膏；將全部粗提物浸膏用甲醇b溶解后用0.22μm有機濾頭進行過濾，濾液選用高效液相色譜分析型色譜柱進行等度洗脫，流動相為體積比70:30的乙腈與水，收集第16min的流出液，去溶劑，干燥，獲得所述式(I)所示環縮肽類化合物。

3.如權利要求2所述環縮肽類化合物的制備方法，其特征在于，步驟(1)所述尖孢鐮刀菌CGMCC No.17763發酵前先活化，種子擴大培養，再將種子液以50mL/L的接種量接種至GPY培養基；所述活化和種子擴大培養按如下步驟進行：①活化培養：將尖孢鐮刀菌CGMCCNo.17763接入PDA斜面培養基，28℃培養箱培養3-4天，活化菌種；PDA斜面培養基終濃度組成為：葡萄糖20g/L，馬鈴薯200g/L，瓊脂15-18g/L，溶劑為蒸餾水，pH自然；②種子培養：從步驟①活化菌落中挑取一接種環菌體接種至PDB種子培養基，在200rpm、28℃條件下搖床培養3天，獲得種子液；PDB種子培養基終濃度組成為：馬鈴薯200g/L，葡萄糖20g/L，溶劑為蒸餾水，pH自然。

4.如權利要求2所述環縮肽類化合物的制備方法，其特征在于，步驟(2)所述超聲條件為：30-50kHz超聲15-20min。

5.如權利要求2所述環縮肽類化合物的制備方法，其特征在于，步驟(2)高效液相色譜條件為：液相儀器：UV-VIS，檢測器：島津SPD-16；高效液相輸液泵：島津LC-16P；色譜條件：分析型色譜柱，C₁₈色譜柱4.6×250mm，流速1.0mL/min，柱溫40℃，檢測波長209nm。

6.一種權利要求1所述環縮肽類化合物在制備抑制腫瘤細胞活性藥物中的應用。

7.如權利要求6所述的應用，其特征在于，所述腫瘤細胞為人乳腺癌耐藥細胞株MCF-7/ADR。

8.一種權利要求1所述環縮肽類化合物在制備抗腫瘤藥物中的應用。