[發明專利]基于納米孔測序儀的靶向擴增引物、擴增建庫方法及應用在審
| 申請號： | 202211004947.0 | 申請日： | 2022-08-22 |
| 公開（公告）號： | CN115198002A | 公開（公告）日： | 2022-10-18 |
| 發明（設計）人： | 毛凌峰;楊狄;唐旖 | 申請（專利權）人： | 杭州柏熠科技有限公司 |
| 主分類號： | C12Q1/6806 | 分類號： | C12Q1/6806;C12Q1/689;C12Q1/6869;C40B50/06 |
| 代理公司： | 杭州匯和信專利代理有限公司 33475 | 代理人： | 吳琰 |
| 地址： | 310000 浙江省杭州市濱江*** | 國省代碼： | 浙江;33 |
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| 摘要： | |||
| 搜索關鍵詞： | 基于 納米 孔測序儀 靶向 擴增 引物 方法 應用 | ||
1.一種基于納米孔測序儀的靶向擴增引物，其特征在于，由依次排序的定位序列、分子標簽序列和擴增引物組成。
2.根據權利要求1所述的基于納米孔測序儀的靶向擴增引物，其特征在于，擴增引物為16s基因通用引物。
3.根據權利要求2所述的基于納米孔測序儀的靶向擴增引物，其特征在于，擴增引物為覆蓋16srDNA基因全長的16s基因通用引物。
4.根據權利要求1所述的基于納米孔測序儀的靶向擴增引物，其特征在于，分子標簽序列的3’端接在擴增引物的5’端，分子標簽序列的5’端連接定位序列。
5.一種基于納米孔測序儀的靶向擴增引物的擴增建庫方法，其特征在于，包括：
針對待測序序列設計至少一靶向擴增引物，其中每一所述靶向擴增引物為定位序列、分子標簽序列和擴增引物序列的組合序列；
將靶向擴增引物和待測序序列混合進行靶向擴增，得到擴增產物；
對所述擴增產物進行末端修復后連接接頭。
6.根據權利要求5所述的基于納米孔測序儀的靶向擴增引物的擴增建庫方法，其特征在于，經過靶向擴增后的多個擴增產物混樣建庫得到單一樣品，對單一樣品進行末端修復。
7.根據權利要求5所述的基于納米孔測序儀的靶向擴增引物的擴增建庫方法，其特征在于，至少一分子標簽序列和至少一擴增引物結合形成多個靶向擴增引物。
8.根據權利要求5所述的基于納米孔測序儀的靶向擴增引物的擴增建庫方法，其特征在于，擴增引物為16s基因通用引物。
9.根據權利要求5所述的基于納米孔測序儀的靶向擴增引物的擴增建庫方法，其特征在于，分子標簽序列的3’端接在擴增引物的5’端，分子標簽序列的5’端連接定位序列。
10.一種基于納米孔測序儀的靶向擴增引物的擴增建庫方法的應用，其特征在于，采用權利要求5-9任一所述的基于納米孔測序儀的靶向擴增引物的擴增建庫方法對細菌進行納米孔測序。
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