[發(fā)明專利]超高效液相高分辨質(zhì)譜非靶標(biāo)代謝組學(xué)的檢測方法及應(yīng)用

在審

• 申請?zhí)枺?/td>: 202210993661.3
• 申請日: 2022-08-18
• 公開（公告）號: CN115932066A
• 公開（公告）日: 2023-04-07
• 發(fā)明（設(shè)計(jì)）人: 鄧軍亮;杜杰;鐘召赟
• 申請（專利權(quán)）人: 上海百趣生物醫(yī)學(xué)科技有限公司
• 主分類號: G01N30/02
• 分類號: G01N30/02;G01N30/06;G01N30/30;G01N30/32;G01N30/34;G01N30/72
• 代理公司: 上海微策知識產(chǎn)權(quán)代理事務(wù)所(普通合伙) 31333
• 代理人: 陶亮

1.一種超高效液相高分辨質(zhì)譜非靶標(biāo)代謝組學(xué)的檢測方法，其特征在于，包括以下步驟：

(1)代謝物提取：將待測樣品與提取液混合，加入同位素標(biāo)記內(nèi)標(biāo)混合，旋渦混勻20-40s，然后超聲，靜置，離心，取上清液；

(2)上機(jī)檢測：將上清液加入超高效液相色譜-高分辨質(zhì)譜中，根據(jù)設(shè)置的程序進(jìn)行檢測；

(3)數(shù)據(jù)處理：將得到的原始數(shù)據(jù)經(jīng)軟件轉(zhuǎn)成mzXML格式，然后進(jìn)行峰識別，峰提取，峰對齊，積分的處理，，然后與質(zhì)譜數(shù)據(jù)庫匹配進(jìn)行物質(zhì)注釋。

2.根據(jù)權(quán)利要求1所述超高效液相高分辨質(zhì)譜非靶標(biāo)代謝組學(xué)的檢測方法，其特征在于，所述提取液選自甲醇、乙腈、水、乙醇、丙酮、乙酸乙酯中的一種或幾種的組合。

3.根據(jù)權(quán)利要求1所述超高效液相高分辨質(zhì)譜非靶標(biāo)代謝組學(xué)的檢測方法，其特征在于，所述超聲時(shí)間為5-20min，超聲時(shí)采用冰水浴。

4.根據(jù)權(quán)利要求1所述超高效液相高分辨質(zhì)譜非靶標(biāo)代謝組學(xué)的檢測方法，其特征在于，所述步驟1的靜置為在-30～-50℃的環(huán)境中靜置0.5-1.5h。

5.根據(jù)權(quán)利要求1所述超高效液相高分辨質(zhì)譜非靶標(biāo)代謝組學(xué)的檢測方法，其特征在于，所述步驟1的離心溫度為4℃，離心力為13000-14000g，離心機(jī)半徑為8-9cm，離心機(jī)轉(zhuǎn)速為10000-15000rpm。

6.根據(jù)權(quán)利要求1所述超高效液相高分辨質(zhì)譜非靶標(biāo)代謝組學(xué)的檢測方法，其特征在于，當(dāng)檢測的樣品為固態(tài)時(shí)，還需要在超聲前進(jìn)行研磨，研磨頻率為30-40Hz。

7.根據(jù)權(quán)利要求1或2所述超高效液相高分辨質(zhì)譜非靶標(biāo)代謝組學(xué)的檢測方法，其特征在于，所述步驟2中超高效液相色譜中色譜柱的尺寸為2.1mm×100mm，色譜柱填料的粒徑為1-3.5μm。

8.根據(jù)權(quán)利要求1所述超高效液相高分辨質(zhì)譜非靶標(biāo)代謝組學(xué)的檢測方法，其特征在于，所述步驟2超高效液相色譜中流動(dòng)相A相為水相，B相為乙腈。

9.根據(jù)權(quán)利要求8所述超高效液相高分辨質(zhì)譜非靶標(biāo)代謝組學(xué)的檢測方法，其特征在于，所述超高效液相色譜中水相中還包含乙酸銨和氨水，乙酸銨的摩爾濃度為20-30mmol/L，氨水的摩爾濃度為20-30mmol/L。

10.一種根據(jù)權(quán)利要求1-9任一項(xiàng)所述超高效液相高分辨質(zhì)譜非靶標(biāo)代謝組學(xué)的檢測方法的應(yīng)用，其特征在于，用于生物體液體或固體組織樣本的代謝組學(xué)分析中。