[發(fā)明專利]一種歐月組織培養(yǎng)繁殖方法在審
| 申請?zhí)枺?/td> | 202210983929.5 | 申請日： | 2022-08-17 |
| 公開（公告）號： | CN115299344A | 公開（公告）日： | 2022-11-08 |
| 發(fā)明（設(shè)計）人： | 高運茹;蘇陽;崔錦;郭嬌嬌;申彥平;牛云譜;閆庚戌;孟維英;崔澤華 | 申請（專利權(quán)）人： | 河北高澤科技有限公司;河北省林業(yè)和草原科學(xué)研究院 |
| 主分類號： | A01H4/00 | 分類號： | A01H4/00 |
| 代理公司： | 石家莊國鉞天璽專利代理事務(wù)所(普通合伙) 13155 | 代理人： | 王朝 |
| 地址： | 050000 河北省石家莊市*** | 國省代碼： | 河北;13 |
| 權(quán)利要求書： | 查看更多 | 說明書： | 查看更多 |
| 摘要： | |||
| 搜索關(guān)鍵詞： | 一種 組織培養(yǎng) 繁殖 方法 | ||
本發(fā)明涉及一種歐月組織培養(yǎng)繁殖方法，其包括如下步驟：選取生長健壯、無病蟲害、芽體飽滿的當(dāng)年生嫩枝為外植體，用小毛刷蘸中性洗衣粉將莖段洗刷干凈，然后用自來水沖2～3h；在超凈工作臺上用75％酒精處理莖段30s，無菌水沖洗3～5次，隨后用0.1％HgCl2或6％次氯酸鈉對莖段進行消毒；莖段接種于初代培養(yǎng)腋芽誘導(dǎo)培養(yǎng)基，培養(yǎng)20d；再依次經(jīng)繼代培養(yǎng)和生根培養(yǎng)。本發(fā)明在外植體消毒階段采用兩次消毒的方法，降低了污染率并提高了成活率，使用合理的初代、繼代和生根培養(yǎng)基配方和培養(yǎng)條件，可滿足產(chǎn)業(yè)化繁殖需要。
技術(shù)領(lǐng)域
本發(fā)明涉及植物繁殖技術(shù)，具體涉及一種歐月組織培養(yǎng)繁殖方法。
背景技術(shù)
月季是一種集觀賞、藥用為一體的花卉植物。其繁殖方式可分為：扦插繁殖、嫁接繁殖、播種繁殖、分株繁殖和組織培養(yǎng)等。扦插繁殖和嫁接繁殖在生產(chǎn)上應(yīng)用較為普遍，但存在費工費時、生產(chǎn)成本高、育苗周期長等諸多問題。月季的組培快繁不僅可以保持品種的優(yōu)良性狀，同時可以實現(xiàn)種苗的工廠化生產(chǎn)，快速滿足生產(chǎn)上對高品質(zhì)種苗的需求。
月季的組培快繁主要包括如下步驟：選擇合適的外植體、外植體的消毒、初代培養(yǎng)、繼代培養(yǎng)、生根培養(yǎng)和煉苗移栽。
朱淑新、袁婉君等學(xué)者在月季組培對消毒時間進行了研究，表明消毒時間過短不利于解決外植體的帶菌問題，會造成消毒不徹底，從而導(dǎo)致初代培養(yǎng)下的莖段成活率較低，污染率較高。然而，過長的消毒時間會對外植體造成傷害，同樣會帶來成活率較低的問題。
發(fā)明內(nèi)容
本發(fā)明的目的是提供一種成活率高、增殖系數(shù)高、植株根系發(fā)達的歐月組織培養(yǎng)繁殖方法。
本發(fā)明采用如下技術(shù)方案：
一種歐月組織培養(yǎng)繁殖方法，其包括如下步驟：
(1)選取生長健壯、無病蟲害、芽體飽滿的當(dāng)年生嫩枝為外植體，剪成帶2個芽眼，長1～2cm的莖段，剪去葉片和刺、保留1～3個葉柄，用小毛刷蘸中性洗衣粉將莖段洗刷干凈，然后用自來水沖2～3h；
(2)在超凈工作臺上用75％酒精處理莖段30s，無菌水沖洗3～5次，隨后用0.1％HgCl2或6％次氯酸鈉對莖段進行消毒；
(3)莖段接種于初代培養(yǎng)腋芽誘導(dǎo)培養(yǎng)基，接種后置于23～27℃培養(yǎng)室，光照強度2000～2500lx，光照時間12～16h/d，培養(yǎng)20d。
(4)將步驟(3)處理得到的莖段接種于繼代培養(yǎng)基，接種后置于23～27℃培養(yǎng)室，光照強度2000～2500lx，光照時間12～16h/d，培養(yǎng)40d；
(5)將步驟(4)處理得到的莖段接種于生根培養(yǎng)基，接種后置于23～27℃培養(yǎng)室，光照強度2000～2500lx，光照時間12～16h/d，培養(yǎng)40d。
進一步的，使用0.1％HgCl2對莖段浸泡消毒5～15min。
進一步的，使用6％次氯酸鈉對莖段浸泡消毒15～25min。
進一步的，所述初代培養(yǎng)腋芽誘導(dǎo)培養(yǎng)基為包含6g/L瓊脂和100ul/L氫氧化鈉的MS培養(yǎng)基，pH為5.8。
進一步的，所述繼代培養(yǎng)基為包含1～3mg/L 6-BA和0.1～0.3mg/L NAA的MS培養(yǎng)基，pH為5.8。
進一步的，所述生根培養(yǎng)基為包含0.05～1mg/L NAA的1/2MS培養(yǎng)基，pH為5.8。
本發(fā)明的有益效果在于：本發(fā)明在外植體消毒階段采用兩次消毒的方法，降低了污染率并提高了成活率。使用合理的初代、繼代和生根培養(yǎng)基配方和培養(yǎng)條件，可滿足產(chǎn)業(yè)化繁殖需要。
附圖說明
圖1為3個歐月品種不同氯化汞處理莖段萌芽情況；
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