[發明專利]一種歐月組織培養繁殖方法

在審

• 申請號: 202210983929.5
• 申請日: 2022-08-17
• 公開（公告）號: CN115299344A
• 公開（公告）日: 2022-11-08
• 發明（設計）人: 高運茹;蘇陽;崔錦;郭嬌嬌;申彥平;牛云譜;閆庚戌;孟維英;崔澤華
• 申請（專利權）人: 河北高澤科技有限公司;河北省林業和草原科學研究院
• 主分類號: A01H4/00
• 分類號: A01H4/00
• 代理公司: 石家莊國鉞天璽專利代理事務所(普通合伙) 13155
• 代理人: 王朝

1.一種歐月組織培養繁殖方法，其特征在于，其包括如下步驟：

(1)選取生長健壯、無病蟲害、芽體飽滿的當年生嫩枝為外植體，剪成帶2個芽眼，長1～2cm的莖段，剪去葉片和刺、保留1～3個葉柄，用小毛刷蘸中性洗衣粉將莖段洗刷干凈，然后用自來水沖2～3h；

(2)在超凈工作臺上用75％酒精處理莖段30s，無菌水沖洗3～5次，隨后用0.1％HgCl₂或6％次氯酸鈉對莖段進行消毒；

(3)莖段接種于初代培養腋芽誘導培養基，接種后置于23～27℃培養室，光照強度2000～2500lx，光照時間12～16h/d，培養20d。

(4)將步驟(3)處理得到的莖段接種于繼代培養基，接種后置于23～27℃培養室，光照強度2000～2500lx，光照時間12～16h/d，培養40d；

(5)將步驟(4)處理得到的莖段接種于生根培養基，接種后置于23～27℃培養室，光照強度2000～2500lx，光照時間12～16h/d，培養40d。

2.根據權利要求1所述的一種歐月組織培養繁殖方法，其特征在于，使用0.1％HgCl₂對莖段浸泡消毒5～15min。

3.根據權利要求1所述的一種歐月組織培養繁殖方法，其特征在于，使用6％次氯酸鈉對莖段浸泡消毒15～25min。

4.根據權利要求1～3任一項所述的一種歐月組織培養繁殖方法，其特征在于，所述初代培養腋芽誘導培養基為包含6g/L瓊脂、30g/L、100ul/L氫氧化鈉的MS培養基，pH為5.8。

5.根據權利要求1～3任一項所述的一種歐月組織培養繁殖方法，其特征在于，所述繼代培養基為包含1～3mg/L 6-BA和0.1～0.3mg/L NAA的MS培養基，pH為5.8。

6.根據權利要求1～3任一項所述的一種歐月組織培養繁殖方法，其特征在于，所述生根培養基為包含0.05～1mg/L NAA和IBA的1/2MS培養基，pH為5.8。