[發(fā)明專利]從山茱萸中提取的四個環(huán)烯醚萜苷化合物及其制備方法與應(yīng)用

在審

• 申請?zhí)枺?/td>: 202210980491.5
• 申請日: 2022-08-16
• 公開（公告）號: CN115304653A
• 公開（公告）日: 2022-11-08
• 發(fā)明（設(shè)計）人: 郝志友;楊夢;馮衛(wèi)生;王小蘭;鄭曉珂;張艷麗;李孟;周詩琪;孫彥君;弓建紅;陳輝;王彥志
• 申請（專利權(quán)）人: 河南中醫(yī)藥大學(xué)
• 主分類號: C07H17/04
• 分類號: C07H17/04;C07H1/08;A61K31/7048;A61P3/10
• 代理公司: 鄭州天陽專利事務(wù)所(普通合伙) 41113
• 代理人: 蔡文雅

1.從山茱萸中提取的四個環(huán)烯醚萜苷化合物，其特征在于，分別為新的化合物環(huán)烯醚萜苷cornuofficinaliside F(1)、cornuofficinaliside H(2)、cornuofficinaliside L(3)和cornuofficinaliside O(4)，化學(xué)結(jié)構(gòu)式分別為：

2.權(quán)利要求1所述的從山茱萸中提取的四個環(huán)烯醚萜苷化合物的制備方法，其特征在于，包括以下步驟：

1)將山茱萸果肉10–100kg，用2–10倍量去離子水在80–100℃下回流提取1–3次，每次1–3小時，提取液減壓濃縮成浸膏，該浸膏用水溶解后通過D-101大孔吸附樹脂柱，先用超純水洗脫，然后用95％乙醇洗脫；

2)95％乙醇洗脫部位用水溶解后，依次分別用石油醚、乙酸乙酯、正丁醇萃取3–10次，正丁醇萃取部位減壓濃縮成浸膏后，用水溶解，過Diaion HP-20大孔吸附樹脂，分別以EtOH-H₂O按體積比0:100、20:80、30:70、40:60、95:5梯度洗脫，各流分用硅膠GF254薄層板檢識，以體積比為4:1–1:1的二氯甲烷-甲醇做展開劑，10％硫酸乙醇液做顯色劑，合并相似流分，得到5個部位BF1–BF5；

3)將步驟2)得到的BF2部位過MCI柱，以MeOH-H₂O按體積比0:100、20:80、40:60、60:40、100:0梯度洗脫，合并相似流分，得到5個部位BF2a–BF2e，BF2b部位過Toyopearl HW-40gel柱，以甲醇洗脫，合并相似流分，得3個部位BF2b1–BF2b3，BF2b1再次通過Toyopearl HW-40柱，以MeOH-H₂O按體積比20:80、50:50、70:30、100:0梯度洗脫，合并相似流分，得7個部位BF2b1a–BF2b1g；

4)將步驟3)得到的BF2b1a通過硅膠柱，以CH₂Cl₂-MeOH-H₂O按體積比10:1:0.1梯度洗脫，合并相似流分，得5個部分BF2b1a1–BF2b1a5，BF2b1部位通過Toyopearl HW-40柱，以MeOH-H₂O按體積比20:80、50:50、70:30、100:0梯度洗脫，得7個部位BF2b1a–BF2b1g，BF2b1a部位經(jīng)硅膠柱層析，用CH₂Cl₂-MeOH-H₂O按體積比10:1:0.1洗脫，得到5個部位BF2b1a1–BF2b1a5；

5)將步驟4)得到的BF2b1a4部位進行半制備液相分離，分離條件17％MeCN,3mL/min，收集保留時間50min和60min之間的峰，再次進行半制備液相分離，分離條件COSMOSIL C18-MS-II柱，5μm，10×250mm；20％MeCN，3mL/min，得到化合物2和3；

6)將步驟3)得到的BF2c部位通過硅膠柱，以CH₂Cl₂-MeOH按體積比30:1、20:1、15:1、10:1、5:1、1:1梯度洗脫，得5個部位BF2c1–BF2c5，BF2c2通過硅膠柱，以CH₂Cl₂-MeOH按體積比20:1、15:1、10:1、5:1梯度洗脫，得9個部位BF2c2a–BF2c2i；

7)將步驟6)得到的BF2c2g部位經(jīng)半制備HPLC純化，上COSMOSIL C18-MS-II柱，5μm，10×250mm；42％MeOH,3mL/min，得化合物1；

8)將步驟6)得到的BF2c3部位用Sephadex LH-20柱層析，以CH₂Cl₂-MeOH按體積比1:1洗脫，得到3個部位BF2c3a–BF2c3c，BF2c3b部位用半制備HPLC純化，上COSMOSIL C18-MS-II柱，5μm，10×250mm；19％MeCN；3mL/min，得到化合物4。