[發明專利]一種磺胺二甲嘧啶降解菌劑及其制備方法和應用

在審

• 申請號: 202210979877.4
• 申請日: 2022-08-16
• 公開（公告）號: CN115141782A
• 公開（公告）日: 2022-10-04
• 發明（設計）人: 林輝;張錦;成琪璐;馬軍偉;俞巧鋼;孫萬春;葉靜;王強;鄒平;陳照明;馬進川;王峰;劉洋之
• 申請（專利權）人: 浙江省農業科學院
• 主分類號: C12N1/20
• 分類號: C12N1/20;C02F3/34;C02F11/02;C02F103/20;C12R1/01;C12R1/06;C12N1/36;C12N1/02
• 代理公司: 杭州恒翌專利代理事務所(特殊普通合伙) 33298
• 代理人: 柯奇君

本發明涉及環保領域。一種磺胺二甲氧嘧啶混合菌劑，包括原玻璃蠅節桿菌（Arthrobacter protophormiae）和不動桿菌（Acinetobacter sp.）。本發明的磺胺二甲氧嘧啶混合菌劑源于畜禽糞便，與糞便堆肥原生微生物菌群兼容性良好。

技術領域

本發明涉及環保領域，特別涉及一種磺胺二甲嘧啶降解菌劑及其制備方法及其畜禽糞污抗生素去除中的應用。

背景技術

養殖業是抗生素應用的主要領域。養殖糞污中抗生素殘留普遍，若未處理完全，將伴隨廢水、糞便排放進入環境，對人體及生態環境造成危害。如何有效去除畜禽糞污中抗生素殘留已成為當下亟待解決的重要問題。

生物降解是解決抗生素環境殘留的有效手段，已引起國內外學者的廣泛關注。目前，磺胺類抗生素降解菌有較多報道，microbacterium，rhodococcus，achromobacter，ralstonia，brevundimonas，pseudomonas，acinetobacter，variovorax，alcaligenes、ochrobactrum、類地桿菌、假單胞菌、氣單胞菌、產堿菌等。

此外，混合微生物群落比起單一微生物有很大的優勢，對環境的適應性更強，多種微生物菌種相互配合，更能滿足多種抗生素同時存在的復合污染現狀，因此混菌降解抗生素的研究也很受關注。特別是實驗室人工篩選構建出的混合菌劑，較成分不完全明確的天然混菌及單一菌株對污染物的生物降解優勢明顯。此外，由于人工構建的混合菌劑的菌種成分明確，因此更容易找到最佳、最合理的生產工藝，產品質量也更穩定，在實際應用中這類菌劑的針對性更強，也更安全合理。然而，目前關于這類菌種明確的抗生素降解混合菌劑的報道還很少。

由上可知，為了滿足日益擴大的抗生素污染的微生物修復需求，能夠根據主要抗生素殘留類型、與介質原生微生物菌群兼容情況等具體應用情況選擇不同的抗生素降解菌種，為混合菌劑配制提供更多菌種資源，篩選更多不同菌屬以及針對不同抗生素的降解菌，擴大抗生素降解微生物菌種庫必不可少。

發明內容

本發明的一個目的是提供一種來源于畜禽糞便，與糞便堆肥原生微生物菌群兼容性良好，磺胺二甲嘧啶降解率高的磺胺二甲氧嘧啶混合菌劑。發明另一個目的是提供上述二甲氧嘧啶混合菌劑的馴化和篩選方法以及在畜禽糞污抗生素去除中的應用。

本發明的具體技術方案為：一種磺胺二甲氧嘧啶混合菌劑，包括原玻璃蠅節桿菌(Arthrobacter protophormiae)和不動桿菌(Acinetobacter sp.)；原玻璃蠅節桿菌(Arthrobacter protophormiae)保藏于中國微生物菌種保藏管理委員會普通微生物中心，保藏編號為CGMCC No. 25224，保藏日期是2022年7月4日，保藏單位地址是北京市朝陽區北辰西路1號院3號；不動桿菌(Acinetobacter sp.)保藏于中國微生物菌種保藏管理委員會普通微生物中心，保藏編號為CGMCC No. 25225，保藏日期是2022年7月4 日，保藏單位地址是北京市朝陽區北辰西路1號院3號。

進一步的，磺胺二甲氧嘧啶混合菌劑由原玻璃蠅節桿菌(Arthrobacterprotophormiae)、不動桿菌(Acinetobacter sp.)、紡綞形賴氨酸芽孢桿菌(Lysinibacillus fusiformis)和微桿菌(Microbacterium mitrae)組成，均從畜禽糞便中馴化、篩選得到；混合菌劑由各菌種等比例混合組成。

磺胺二甲氧嘧啶混合菌劑的馴化和篩選方法，包括以下步驟：

1)稱取冷藏豬糞樣品50g于1L的三角瓶中，加入450ml無菌水(糞便：水＝1:9， v:v)，180rpm，室溫振蕩2小時，濾紙過濾獲得豬糞廢水懸液1，121℃滅菌30min。

2)取冷藏豬糞按照1:1與水混合(100g+100ml)，180rpm，室溫振蕩2小時，靜置2 小時，取上清，獲得豬糞懸濁液2。