[發明專利]一種通過阻遏子降低谷氨酸棒桿菌基因表達的方法

在審

• 申請號: 202210973130.8
• 申請日: 2022-08-15
• 公開（公告）號: CN115786383A
• 公開（公告）日: 2023-03-14
• 發明（設計）人: 徐美娟;饒志明;江安;楊套偉;張顯
• 申請（專利權）人: 江南大學
• 主分類號: C12N15/77
• 分類號: C12N15/77;C12N15/67;C12N1/21;C12N15/31;C12R1/15
• 代理公司: 哈爾濱市陽光惠遠知識產權代理有限公司 23211
• 代理人: 趙巧娜

1.一種調控目的基因表達的系統，其特征在于，所述系統包括響應模塊和結合模塊；

所述結合模塊為：在目的基因上游插入的核苷酸序列如SEQ ID NO.15所示的阻遏蛋白BetI結合序列；所述響應模塊為：偶聯了阻遏蛋白BetI的5’UTR序列的阻遏蛋白基因betI；所述阻遏蛋白BetI的5’UTR序列的核苷酸序列如SEQ ID NO.1～7任一所示，所述阻遏蛋白基因betI的核苷酸序列如SEQ ID NO.17所示；

或，所述結合模塊為：在目的基因上游插入的核苷酸序列如SEQ ID NO.16所示的阻遏蛋白LmrA結合序列；所述響應模塊為：偶聯了阻遏蛋白LmrA的5’UTR序列的阻遏蛋白基因lmrA；所述阻遏蛋白LmrA的5’UTR序列核苷酸序列如SEQ ID NO.8～14任一所示，所述阻遏蛋白基因lmrA的核苷酸序列如SEQ ID NO.18所示。

2.權利要求1所述的調控目的基因表達的系統在重組菌中降低基因表達中的應用。

3.如權利要求2所述的應用，其特征在于，所述應用為，將所述阻遏蛋白BetI結合序列置于重組菌基因組上需降低其表達的目的基因的啟動子下游；

同時，采用表達載體游離表達偶聯了阻遏蛋白BetI的5’UTR序列的阻遏蛋白基因betI。

4.如權利要求2所述的應用，其特征在于，所述應用為，將所述阻遏蛋白LmrA結合序列置于重組菌基因組上需降低其表達的目的基因的啟動子下游；

同時，采用表達載體游離表達偶聯了阻遏蛋白LmrA的5’UTR序列的阻遏蛋白基因lmrA。

5.含有權利要求1所述的調控目的基因表達的系統的重組菌。

6.如權利要求5所述的重組菌，其特征在于，所述重組菌以細菌或真菌為宿主細胞。

7.如權利要求6所述的重組菌，其特征在于，所述宿主細胞為谷氨酸棒桿菌。

8.一種降低谷氨酸棒桿菌中目的基因的表達的方法，其特征在于，將權利要求1所述的阻遏蛋白BetI結合序列置于谷氨酸棒桿菌基因組上需降低其表達的目的基因的啟動子下游；

同時，采用表達載體游離表達偶聯了阻遏蛋白BetI的5’UTR序列的阻遏蛋白基因betI；

或將所述阻遏蛋白LmrA結合序列置于谷氨酸棒桿菌基因組上需降低其表達的目的基因的啟動子下游；

同時，采用表達載體游離表達偶聯了阻遏蛋白LmrA的5’UTR序列的阻遏蛋白基因lmrA。

9.如權利要求8所述的方法，其特征在于，所述谷氨酸棒桿菌包括但不限于：ATCC13032、ATCC14067、SCgG2。

10.權利要求5～7任一所述的重組菌在制備目的蛋白中的應用。