[發(fā)明專(zhuān)利]一種基于動(dòng)態(tài)高壓微射流結(jié)合高效液相色譜技術(shù)分析活性乳清蛋白含量的方法

在審

• 申請(qǐng)?zhí)枺?/td>: 202210970308.3
• 申請(qǐng)日: 2022-08-12
• 公開(kāi)（公告）號(hào): CN115480002A
• 公開(kāi)（公告）日: 2022-12-16
• 發(fā)明（設(shè)計(jì)）人: 俞蘭秀;黃彩娟;楊郁葒
• 申請(qǐng)（專(zhuān)利權(quán)）人: 卡士乳業(yè)（深圳）有限公司
• 主分類(lèi)號(hào): G01N30/02
• 分類(lèi)號(hào): G01N30/02;G01N30/06
• 代理公司: 廣州粵高專(zhuān)利商標(biāo)代理有限公司 44102
• 代理人: 林宇然

1.一種基于動(dòng)態(tài)高壓微射流結(jié)合高效液相色譜技術(shù)分析活性乳清蛋白含量的方法，其特征在于，該方法包括以下步驟：(1)準(zhǔn)確稱(chēng)取乳樣品100.00克，在4℃條件下經(jīng)5000g離心20min，或7000g離心20min，或9000g離心20min，或11000g離心20min脫脂；(2)由步驟(1)得到的樣品取中間清液，用去離子水稀釋2倍，或4倍，或6倍；(3)將由步驟(2)得到的樣品進(jìn)行動(dòng)態(tài)高壓微射流處理：進(jìn)行20MPa處理一次，或20MPa處理兩次，或20MPa處理三次，或40MPa處理一次，或40MPa處理兩次，或40MPa處理三次，或60MPa處理一次，或60MPa處理兩次，或60MPa處理三次；(4)過(guò)0.22μm水系濾膜，進(jìn)行高效液相色譜分析，色譜柱為gel 2000SWXL，規(guī)格為300mm×7.8nm，或C18柱，規(guī)格為4.6mm×250mm，所述的流動(dòng)相為0.1mol/LNaNO₃溶液和0.1mol/L Na₃PO₄-Na₂SO₄緩沖液，或0.2mol/L Na₃PO₄緩沖液，或0.1％三氟乙酸溶液和0.1％三氟乙酸乙腈溶液，其中，NaNO₃的pH為7.0，Na₃PO₄-Na₂SO₄的pH為6.7，Na₃PO₄的pH為7.0；柱溫為35℃或25℃，進(jìn)樣量為10μL，高效液相色譜檢測(cè)器為紫外檢測(cè)器，檢測(cè)波長(zhǎng)為214nm，或220nm，或230nm，或254nm，或280nm；(5)根據(jù)標(biāo)準(zhǔn)曲線獲得樣品中α-乳白蛋白、β-乳球蛋白和乳鐵蛋白的含量。

2.根據(jù)權(quán)利要求1所述的方法，其特征在于，所述的最佳離心脫脂條件為：樣品經(jīng)7000g離心20min。

3.根據(jù)權(quán)利要求1所述的方法，其特征在于，所述的樣品稀釋倍數(shù)最佳為4倍。

4.根據(jù)權(quán)利要求1所述的方法，其特征在于，所述的最佳動(dòng)態(tài)高壓微射流處理方式為：40MPa處理兩次。

5.根據(jù)權(quán)利要求1所述的方法，其特征在于，所述的最佳色譜柱為C18柱，規(guī)格為4.6mm×250mm。

6.根據(jù)權(quán)利要求1所述的方法，其特征在于，所述的高效液相色譜分析流動(dòng)相最佳為0.1％三氟乙酸溶液和0.1％三氟乙酸乙腈溶液。

7.根據(jù)權(quán)利要求1所述方法，其特征在于，所述的高效液相色譜分析最佳檢測(cè)波長(zhǎng)為280nm。

8.根據(jù)權(quán)利要求1所述方法，其特征在于，最佳柱溫為：25℃。