[發明專利]一種蜂房活性成分的制備和分析方法

在審

• 申請號: 202210969924.7
• 申請日: 2022-08-12
• 公開（公告）號: CN115403550A
• 公開（公告）日: 2022-11-29
• 發明（設計）人: 王一飛;劉濤;曾禧銘;葉翠芳
• 申請（專利權）人: 暨南大學
• 主分類號: C07D311/30
• 分類號: C07D311/30;C07D311/40;C07D319/20;G01N30/02;G01N30/06;G01N30/86;A61P39/06;A61P29/00
• 代理公司: 廣州科沃園專利代理有限公司 44416
• 代理人: 徐翔

1.一種蜂房活性成分的制備方法，其特征在于，包括以下步驟：

(1)取晾干的蜂房，采用有機溶劑結合超聲提取，收集提取液經濃縮得到提取物；

(2)將提取物用有機溶劑萃取，收集濃縮得到萃取物；

(3)運用活性指導，采用柱色譜層析、高效液相制備純化得到活性化合物。

2.根據權利要求1所述的蜂房活性成分的制備方法，其特征在于，

在所述步驟(1)中，首先需要將晾干的蜂房粉碎后過20目藥篩，然后加入8倍體積的有機溶劑50％甲醇水溶液進行浸泡24h后超聲1h，共提取三次，濃縮后得到提取物。

3.根據權利要求1所述的蜂房活性成分的制備方法，其特征在于，

在所述步驟(2)中，將提取物溶于8倍重量的純水中，用有機溶劑乙酸乙酯進行萃取，得到乙酸乙酯萃取部位和水部位。

4.根據權利要求1所述的蜂房活性成分的制備方法，其特征在于，

對所述步驟(3)中獲得的活性化合物進行DPPH清除實驗和LPS誘導的RAW 264.7細胞炎癥NO抑制實驗，檢測出具有抗氧化活性和抗炎活性的化合物。

5.根據權利要求1所述的蜂房活性成分的制備方法，其特征在于，步驟(3)中所述活性化合物分別為：山奈酚(1)，槲皮素(2)，trans-2-(3',4'-dihydroxyphenyl)-3-acetylamino-7-(N-acetyl-2-aminoethyl)-1,4-ben zodioxane(3)，

trans-2-(3',4'-dihydroxyphenyl)-3-acetylamino-6-(N-acetyl-2-aminoethyl)-1,4-ben zodioxane(4)，

trans-2-(3',4'-dihydroxyphenyl)-3-acetylamino-7-(N-acetyl-2-aminoethylene)-1,4-benzodioxane(5)；

化合物1-5的結構式分別為：

6.一種蜂房活性成分的分析方法，其特征在于，包括以下步驟：

(1)取晾干的蜂房，采用有機溶劑結合超聲提取，收集提取液經濃縮得到提取物；

(2)將提取物用有機溶劑萃取，收集濃縮得到萃取物；

(3)運用活性指導，采用柱色譜層析、高效液相制備純化得到活性化合物；

(4)結合不同蜂房的特征成分和蜂房代表性藥物虎貞清風膠囊的有效成分，建立蜂房的HPLC質量分析方法。

7.根據權利要求6所述的蜂房活性成分的分析方法，其特征在于，

在所述步驟(1)中，首先需要將晾干的蜂房粉碎后過20目藥篩，然后加入8倍體積的有機溶劑50％甲醇水溶液進行浸泡24h后超聲1h，共提取三次，濃縮后得到提取物。

8.根據權利要求6所述的針對蜂房活性成分的分析方法，其特征在于，

在所述步驟(2)中，將提取物溶于8倍重量的純水中，用有機溶劑乙酸乙酯進行萃取，得到乙酸乙酯萃取部位和水部位。