[發明專利]一種粘多糖貯積癥生物標記物及應用

有效

• 申請號: 202210958378.7
• 申請日: 2022-08-11
• 公開（公告）號: CN115032377B
• 公開（公告）日: 2022-11-01
• 發明（設計）人: 譚曉杰;張元媛
• 申請（專利權）人: 裕菁科技（上海）有限公司
• 主分類號: G01N33/50
• 分類號: G01N33/50;G01N30/02;G01N30/72;G01N30/06
• 代理公司: 上海段和段律師事務所 31334
• 代理人: 郭國中

本發明涉及一種粘多糖貯積癥生物標記物及應用。所述生物標志物包括：艾杜糖酸?(1?O?4)?N?磺基胺基葡萄糖苷，艾杜糖酸?(1?O?4)?N,6?二磺基胺基葡萄糖苷，4,5?不飽和葡萄糖酸?(1?O?3)?6?磺基?N?乙酰胺基半乳糖苷，4,5?不飽和葡萄糖酸?(1?O?4)?N?乙酰胺基葡萄糖苷，4,5?不飽和葡萄糖酸?(1?O?3)?N?磺基胺基葡萄糖苷。本發明根據粘多糖化合物的基本結構及粘多糖貯積癥的發病機理分析，認識到尿液中特定的二糖單元可作為粘多糖貯積癥篩查的生物標志物，并成功用于粘多糖貯積癥的篩查和粘多糖貯積癥I型，II型和IVA型的區分。

技術領域

本發明涉及醫藥技術領域，具體涉及一種粘多糖貯積癥生物標記物及應用。

背景技術

粘多糖亦稱為糖胺聚糖，屬于多糖類化合物，其化學結構由糖醛酸和氨基己糖組成的二糖單元交替重復排列，部分結構可含磺酸基團。根據具體組成的二糖單元不同，可分為硫酸類肝素、硫酸軟骨素、硫酸皮膚素、硫酸角質素等。粘多糖廣泛存在于哺乳動物體內，是骨基質和結締組織細胞的主要成分。其在溶酶體中經由特定水解酶代謝降解，任何一種溶酶體酶的缺陷會造成其分解障礙在體內聚積，從而造成骨骼發育障礙、智力遲鈍、肝脾腫大，同時尿液中粘多糖類排出增多，即，粘多糖貯積癥（mucopolysaccharidosis，MPS）。根據酶缺陷類別和臨床表現，將MPS分為I~VII等6型及若干亞型。其中，MPS I型，MPS II型及MPSIVA型為中國人群中發病率相對較高的亞型（分別占MPS發病率的10%~20%左右），其分別為體內艾杜糖醛酸酶、艾杜糖硫酸酯酶、半乳糖胺硫酸酯酶異常所致。

對于MPS I型，因艾杜糖醛酸酶異常，主要影響到體內硫酸類肝素、硫酸皮膚素的代謝，具體為其艾杜糖苷鍵斷裂異常，影響多糖向后續二糖至單糖代謝，進而產生堆積。對于MPS II型，因艾杜糖硫酸酯酶異常，主要影響到體內硫酸類肝素、硫酸皮膚素的代謝，具體為其艾杜糖苷單元上磺酸基代謝異常，無法有效清除，影響后續代謝至堆積。和I型蓄積的化合相比，主要區別在于蓄積化合物上磺酸基團的保留。對于MPS IVA型，為半乳糖胺硫酸酯酶異常，主要影響到體內硫酸軟骨素、硫酸角質素的代謝，進而產生對應的磺酸基半乳糖胺相關結構蓄積。和I型與II型不同，IVA型并不影響硫酸類肝素代謝。蓄積的粘多糖隨尿液排出體內，通過外加裂解酶的方式，可以將尿液中分子量較大的粘多糖裂解為其對應的二糖單元，保留其特定的蓄積特異性結構。分析不同亞型的發病機理，做出推斷，如果可以有效提取出生物基質中特定的二糖單元并對其進行檢測，可實現對粘多糖貯積癥篩查的同時，區分疾病亞型。

臨床上粘多糖貯積癥篩查的經典方法為比色法，對尿液中粘多糖總量進行快速檢測，實現MPS患者和正常人群的區分。但因其不能區分具體粘多糖類型而無法對MPS具體亞型做出判斷（參見申請號為201710883968.7的中國專利，公開了“一種粘多糖檢測試劑盒”）。液相色譜串聯質譜法因其靈敏度高、特異性強、監測通量高的特點，更適合于不同類型粘多糖的同時監測。

本發明通過液相色譜串聯質譜檢測平臺，對不同亞型（I、II、IVA）的粘多糖貯積癥患者樣本和健康人群樣本進行不同二糖單元的檢測，篩選出特定的二糖單元，包括：艾杜糖酸-(1-O-4)-N-磺基胺基葡萄糖苷(I0S0)，艾杜糖酸-(1-O-4)-N,6-二磺基胺基葡萄糖苷(I2S6)，4,5-不飽和葡萄糖酸-(1-O-3)-6-磺基-N-乙酰胺基半乳糖苷(D0a6)，4,5-不飽和葡萄糖酸-(1-O-4)-N-乙酰胺基葡萄糖苷(D0A0)，4,5-不飽和葡萄糖酸-(1-O-3)-N-磺基胺基葡萄糖苷(D0S0)中聯合使用作為生物標志物。可以實現粘多糖貯積癥患者的篩查，并有效區分疾病亞型。目前尚無將此幾種標志物聯合使用用于粘多糖貯積癥及相關亞型（I、II、IVA）區分的報道。

發明內容

鑒于此，本發明的目的是提供一種粘多糖貯積癥生物標記物及應用，具體涉及一種生物標志物在粘多糖貯積癥篩查，尤其是亞型I型，II型和IVA型區分上的應用。

本發明的技術方案如下：

第一方面：