[發(fā)明專利]一種蘋果果實紅肉性狀鑒定方法及特異引物對在審
| 申請?zhí)枺?/td> | 202210955220.4 | 申請日： | 2022-08-10 |
| 公開（公告）號： | CN116064892A | 公開（公告）日： | 2023-05-05 |
| 發(fā)明（設(shè)計）人： | 王楠;劉文軍;陳學(xué)森;張宗營;于蕾;梅卓欣;李志強;張淑輝;張靜;毛志泉 | 申請（專利權(quán)）人： | 山東農(nóng)業(yè)大學(xué) |
| 主分類號： | C12Q1/6895 | 分類號： | C12Q1/6895;C12Q1/6858;C12N15/11;A01H1/02;A01H1/04 |
| 代理公司： | 北京紀凱知識產(chǎn)權(quán)代理有限公司 11245 | 代理人： | 何葉喧 |
| 地址： | 271018 *** | 國省代碼： | 山東;37 |
| 權(quán)利要求書： | 查看更多 | 說明書： | 查看更多 |
| 摘要： | |||
| 搜索關(guān)鍵詞： | 一種 蘋果 果實 性狀 鑒定 方法 特異 引物 | ||
1.引物對，命名為特異引物對乙，由序列表的序列5所示的單鏈DNA分子和序列表的序列6所示的單鏈DNA分子組成。
2.權(quán)利要求1所述特異引物對乙在鑒定蘋果果肉花青苷含量中的應(yīng)用。
3.權(quán)利要求1所述特異引物對乙在鑒定或選育紅肉蘋果中的應(yīng)用。
4.一種鑒定蘋果植株的果肉花青苷含量的方法，包括如下步驟：
以供試蘋果植株的基因組DNA為模板，采用權(quán)利要求1所述特異引物對乙進行PCR擴增；
如果PCR擴增產(chǎn)物為一種且大小為385bp，供試蘋果植株為M1M1基因型；如果PCR擴增產(chǎn)物為兩種且大小分別為385bp和222bp，供試蘋果植株為M1M2基因型；
M1M1基因型蘋果植株的果肉花青苷含量高于M1M2基因型蘋果植株的果肉花青苷含量。
5.一種鑒定或選育生產(chǎn)紅肉蘋果的蘋果植株的方法，包括如下步驟：
以供試蘋果植株的基因組DNA為模板，采用權(quán)利要求1所述特異引物對乙進行PCR擴增；如果PCR擴增產(chǎn)物為一種且大小為385bp，供試蘋果植株為M1M1基因型；M1M1基因型蘋果植株為候選的生產(chǎn)紅肉蘋果的蘋果植株。
6.引物組合，由特異引物對甲和特異引物對乙組成；
所述特異引物對甲由序列表的序列1所示的單鏈DNA分子和序列表的序列2所示的單鏈DNA分子組成；
所述特異引物對乙為權(quán)利要求1所述特異引物對乙。
7.權(quán)利要求6所述引物組合在鑒定蘋果果肉花青苷含量中的應(yīng)用。
8.權(quán)利要求6所述引物組合在鑒定或選育紅肉蘋果中的應(yīng)用。
9.一種蘋果育種方法，包括如下步驟：
(1)將R1R1基因型的蘋果品種和R6R6基因型的蘋果品種進行雜交，獲得雜交后代；
(2)從R1R6基因型的雜交后代中選擇M1M1基因型的植株；
R1R1基因型、R6R6基因型和R1R6基因型的判斷方法如下：以供試蘋果植株的基因組DNA為模板，采用權(quán)利要求6中所述的特異引物對甲進行PCR擴增，如果PCR擴增產(chǎn)物顯示為一條帶且大小為493bp，供試蘋果植株為R6R6基因型；如果PCR擴增產(chǎn)物顯示為一條帶且大小為392bp，供試蘋果植株為R1R1基因型；如果PCR擴增產(chǎn)物顯示為兩條帶且大小分別為493bp和392bp，供試蘋果植株為R1R6基因型；
M1M1基因型的判斷方法如下：以供試蘋果植株的基因組DNA為模板，采用權(quán)利要求1中所述的特異引物對乙進行PCR擴增；如果PCR擴增產(chǎn)物為一種且大小為385bp，供試蘋果植株為M1M1基因型。
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