[發(fā)明專利]一種人體蠕形螨體外培養(yǎng)原液及其培養(yǎng)液和復(fù)合培養(yǎng)液

在審

• 申請(qǐng)?zhí)枺?/td>: 202210955154.0
• 申請(qǐng)日: 2022-08-10
• 公開(kāi)（公告）號(hào): CN115336678A
• 公開(kāi)（公告）日: 2022-11-15
• 發(fā)明（設(shè)計(jì)）人: 陳國(guó)慶;湛孝東;谷生麗;汪海波;張大存;牛雪彬;蔣峰;劉婷;汪婧璇;曹佳誠(chéng);李麟豪;夏鈺婷;吳宇煬;付曉;陶暢
• 申請(qǐng)（專利權(quán)）人: 山東九鑫日用化工有限公司;皖南醫(yī)學(xué)院;東平九鑫生物化學(xué)有限公司;山東九鑫生物科技有限公司
• 主分類號(hào): A23K50/90
• 分類號(hào): A23K50/90;A23K20/158;A23K20/105;A23K20/147;A23K20/163;A23K20/142;A23K20/20;A23K20/174;A23K20/195;A23K20/22;A23K10/20;A01K67/033
• 代理公司: 合肥信誠(chéng)兆佳知識(shí)產(chǎn)權(quán)代理事務(wù)所(特殊普通合伙) 34159
• 代理人: 李玉寧

本發(fā)明公開(kāi)了一種人體蠕形螨體外培養(yǎng)原液，其原料按質(zhì)量百分比包括：甘油三酯40?50％，膽固醇22?26％，角鯊烯16?20％，甘油二酯8?12％，蠟脂1?3％，余量為吐溫?80。本發(fā)明公開(kāi)了一種人體蠕形螨體外培養(yǎng)液，包括：上述人體蠕形螨體外培養(yǎng)原液和生理鹽水，上述人體蠕形螨體外培養(yǎng)原液和生理鹽水的體積比為0.5?1.5：100。本發(fā)明公開(kāi)了一種人體蠕形螨復(fù)合培養(yǎng)液，包括：上述述人體蠕形螨體外培養(yǎng)液和改良RPMI?1640培養(yǎng)液，上述人體蠕形螨體外培養(yǎng)液和改良RPMI?1640培養(yǎng)液的體積比為10：1?6。本發(fā)明公開(kāi)了上述人體蠕形螨復(fù)合培養(yǎng)液制備方法。本發(fā)明公開(kāi)了一種人體蠕形螨的培養(yǎng)方法。

技術(shù)領(lǐng)域

本發(fā)明涉及蠕形螨培養(yǎng)技術(shù)領(lǐng)域，尤其涉及一種人體蠕形螨體外培養(yǎng)原液，及一種人體蠕形螨體外培養(yǎng)液，及一種人體蠕形螨復(fù)合培養(yǎng)液及其制備方法，及一種人體蠕形螨的培養(yǎng)方法。

背景技術(shù)

蠕形螨(demodicidmite)是一類在人體寄生的螨類，主要有毛囊蠕形螨(Demodexfolliculorum)和皮脂蠕形螨(Demodexbrevis)兩種。以往認(rèn)為蠕形螨是不致病或低致病性的，因?yàn)榻^大多數(shù)人體蠕形螨感染者無(wú)自覺(jué)癥狀，表現(xiàn)為無(wú)癥狀的帶蟲(chóng)者，或僅有輕微癢感或燒灼感。所表現(xiàn)的臨床癥狀因患者的免疫狀態(tài)、營(yíng)養(yǎng)狀況、寄生的蟲(chóng)種及感染度等因素有關(guān)。

這些年研究發(fā)現(xiàn)，人體蠕形螨成蟲(chóng)具有堅(jiān)硬的螯肢、須肢、帶刺的4對(duì)足等，它們?cè)谄つw內(nèi)活動(dòng)時(shí)對(duì)上皮細(xì)胞和腺細(xì)胞造成機(jī)械性破壞，使毛囊、皮脂腺失去正常的結(jié)構(gòu)和功能，引起毛囊擴(kuò)張，上皮變性。當(dāng)寄生蟲(chóng)體較多時(shí)，可引起角化過(guò)度或角化不全，皮脂腺分泌阻塞及真皮層毛細(xì)血管增生并擴(kuò)張等病變；蟲(chóng)體的機(jī)械刺激和其分泌物、代謝物的化學(xué)刺激可引起皮膚組織的炎癥反應(yīng)，導(dǎo)致宿主局部皮膚的非細(xì)菌性炎癥反應(yīng)。此外，蟲(chóng)體代謝物可引起變態(tài)反應(yīng)，蟲(chóng)體的進(jìn)出活動(dòng)攜帶其他病原生物進(jìn)入毛囊或皮脂腺可致繼發(fā)感染，引起毛囊周圍細(xì)胞浸潤(rùn)，纖維組織增生。臨床上常見(jiàn)的癥狀有患處皮膚輕度潮紅和異常油膩，繼而出現(xiàn)彌漫性潮紅、充血，繼發(fā)性紅斑濕疹或散在的針尖至粟粒大小不等的紅色痤瘡狀丘疹、膿瘡、結(jié)痂及脫屑，皮脂異常滲出、毛囊口擴(kuò)大，表面粗糙，皮膚有瘙癢感及燒灼感等。此外，酒渣鼻、毛囊炎、痤瘡、脂溢性皮炎和瞼緣炎等皮膚病患者的蠕形螨感染率及感染度均顯著高于健康人及一般皮膚病患者，表明這些現(xiàn)象可能與蠕形螨的感染有關(guān)。

正因?yàn)槿湫悟闹虏⌒栽絹?lái)越被肯定，所以對(duì)于蠕形螨病的防治也成為研究熱點(diǎn)，特別是對(duì)殺蠕形螨具有抑殺作用的藥物(或日化品)這些年大量出現(xiàn)涌現(xiàn)。我們?cè)诖_定一種藥物(或日化品)是否對(duì)蠕形螨具有殺滅作用時(shí)，要進(jìn)行體外實(shí)驗(yàn)。即通過(guò)擠壓刮拭法或者透明膠紙法將蠕形螨采集到后，加入待測(cè)樣品，計(jì)算殺螨率。但是蠕形螨一旦離開(kāi)人體后很快就會(huì)自行死亡，這給蠕形螨藥物(或日化品)體外殺螨效果的驗(yàn)證帶來(lái)很大困難，因?yàn)闊o(wú)法知道是因?yàn)樗幬镒饔玫乃劳鲞€是因?yàn)槿湫悟孕械乃劳觥?/p>

為了解決這個(gè)問(wèn)題，目前發(fā)現(xiàn)有技術(shù)利用培養(yǎng)細(xì)胞的方法對(duì)蠕形螨進(jìn)行培養(yǎng)，即用RPMI-1640細(xì)胞培養(yǎng)液(含胎牛血清)作為營(yíng)養(yǎng)液培養(yǎng)蠕形螨，該方法雖然延長(zhǎng)了蠕形螨的體外存活時(shí)間，26℃條件下，蠕形螨的平均存活時(shí)間在96小時(shí)左右，存活時(shí)間還不夠理想，無(wú)法滿足體外試驗(yàn)要求。

發(fā)明內(nèi)容

本發(fā)明的目的是為了解決現(xiàn)有技術(shù)中存在的缺點(diǎn)，而提出的一種人體蠕形螨體外培養(yǎng)原液，及一種人體蠕形螨體外培養(yǎng)液，及一種人體蠕形螨復(fù)合培養(yǎng)液及其制備方法，及一種人體蠕形螨的培養(yǎng)方法。

一種人體蠕形螨體外培養(yǎng)原液，其原料按質(zhì)量百分比包括：甘油三酯40-50％，膽固醇22-26％，角鯊烯16-20％，甘油二酯8-12％，蠟脂1-3％，余量為吐溫-80。

基于蠕形螨以人體的皮脂分泌物為食物，因此本發(fā)明采用特定比例的甘油三酯、膽固醇、角鯊烯、甘油二酯、蠟脂配伍，可明顯延長(zhǎng)蠕形螨的體外存活時(shí)間。但角鯊烯是由6個(gè)異戊二烯構(gòu)成的無(wú)環(huán)三萜烯，分子中的六個(gè)雙鍵俱為反式，是一種非環(huán)三萜結(jié)構(gòu)，由于其含六個(gè)雙鍵，極不穩(wěn)定，容易氧化，因此形成的皮脂液中由于角鯊烯易氧化，導(dǎo)致配比無(wú)法滿足蠕形螨的營(yíng)養(yǎng)需求。