[發明專利]一種人體蠕形螨體外培養原液及其培養液和復合培養液

在審

• 申請號: 202210955154.0
• 申請日: 2022-08-10
• 公開（公告）號: CN115336678A
• 公開（公告）日: 2022-11-15
• 發明（設計）人: 陳國慶;湛孝東;谷生麗;汪海波;張大存;牛雪彬;蔣峰;劉婷;汪婧璇;曹佳誠;李麟豪;夏鈺婷;吳宇煬;付曉;陶暢
• 申請（專利權）人: 山東九鑫日用化工有限公司;皖南醫學院;東平九鑫生物化學有限公司;山東九鑫生物科技有限公司
• 主分類號: A23K50/90
• 分類號: A23K50/90;A23K20/158;A23K20/105;A23K20/147;A23K20/163;A23K20/142;A23K20/20;A23K20/174;A23K20/195;A23K20/22;A23K10/20;A01K67/033
• 代理公司: 合肥信誠兆佳知識產權代理事務所(特殊普通合伙) 34159
• 代理人: 李玉寧

1.一種人體蠕形螨體外培養原液，其特征在于，其原料按質量百分比包括：甘油三酯40-50％，膽固醇22-26％，角鯊烯16-20％，甘油二酯8-12％，蠟脂1-3％，余量為吐溫-80。

2.一種人體蠕形螨體外培養液，其特征在于，包括：如權利要求1所述人體蠕形螨體外培養原液和生理鹽水，如權利要求1所述人體蠕形螨體外培養原液和生理鹽水的體積比為0.5-1.5：100。

3.根據權利要求2所述人體蠕形螨體外培養液，其特征在于，還包括：增穩角鯊烯，增穩角鯊烯與如權利要求1所述人體蠕形螨體外培養液的體積比為0.4-0.8：0.5-1.5。

4.根據權利要求2所述人體蠕形螨體外培養液，其特征在于，增穩角鯊烯采用如下具體步驟制取：將1,2-丙二醇加入生理鹽水混合均勻得到預混料；將吐溫-80、膠原蛋白加入角鯊烯中攪拌均勻，然后滴加至預制料中得到增穩角鯊烯。

5.根據權利要求4所述人體蠕形螨體外培養液，其特征在于，1,2-丙二醇、吐溫-80、膠原蛋白、角鯊烯的質量比為1-5：1-2：1-3：20-25。

6.一種人體蠕形螨復合培養液，其特征在于，包括：如權利要求2-5任一項所述人體蠕形螨體外培養液和改良RPMI-1640培養液，如權利要求2-5任一項所述人體蠕形螨體外培養液和改良RPMI-1640培養液的體積比為10：1-6；

改良RPMI-1640培養液包括：RPMI-1640基礎培養液5-15g/L，胎牛血清1-5g/L，葡萄糖1-5g/L，白蛋白5-15g/L，L-谷氨酰胺0.1-0.5g/L，巖藻多糖0.1-0.2g/L，HEPES 2-10g/L，亞硒酸鈉0.1-0.2g/L，維生素C1-2g/L，青霉素0.01-0.1g/L，ATP 6-15mg/L，碳酸氫鈉1-5g/L。

7.一種如權利要求6所述人體蠕形螨復合培養液制備方法，其特征在于，包括如下步驟：

(1)向RPMI-1640基礎培養液中加入胎牛血清、葡萄糖、白蛋白、L-谷氨酰胺、巖藻多糖、HEPES、亞硒酸鈉、維生素C、青霉素、碳酸氫鈉混合均勻，過濾，在使用前加入ATP，得到改良RPMI-1640培養液；

(2)向如權利要求2-5任一項所述人體蠕形螨體外培養液中加入改良RPMI-1640培養液混合均勻，接著采用低劑量電子束輻照滅菌，然后采用γ射線輻照滅菌得到人體蠕形螨復合培養液。

8.根據權利要求7所述人體蠕形螨復合培養液制備方法，其特征在于，步驟(2)中，低劑量電子束輻照滅菌的輻照劑量為0.5-1.2kGy。

9.根據權利要求7所述人體蠕形螨復合培養液制備方法，其特征在于，步驟(2)中，γ射線輻照滅菌的輻照劑量為0.2-0.8kGy。

10.一種人體蠕形螨的培養方法，其特征在于，包括如下步驟：取位于人體面部皮膚的蠕形螨，加入至如權利要求2-5任一項所述人體蠕形螨體外培養液，或，如權利要求6所述人體蠕形螨復合培養液中，置于4-26℃恒溫箱中，控制恒溫箱濕度為50-80％，監控蠕形螨存活率。