[發明專利]一種耐高溫蛋白酶AbTp及其應用

在審

• 申請號: 202210950794.2
• 申請日: 2022-08-09
• 公開（公告）號: CN116004587A
• 公開（公告）日: 2023-04-25
• 發明（設計）人: 萬群;沈其榮;陳慶楠;劉東陽
• 申請（專利權）人: 南京農業大學
• 主分類號: C12N9/52
• 分類號: C12N9/52;C12N15/57;C12N15/70;C12N1/21;C12P21/06;C12R1/19
• 代理公司: 南京天華專利代理有限責任公司 32218
• 代理人: 吳爽;徐冬濤

1.一種蛋白酶AbTp，所述蛋白酶AbTp至少包含氨基酸片段TNNHVVEGA、PFTDLAVIRAE和GGALVNAAGQVI中的一種或多種。

2.根據權利要求1所述的蛋白酶AbTp，所述蛋白酶AbTp的氨基酸序列選自如下（A1）或（A2）：

（A1）氨基酸序列如SEQ?ID?NO:1所示；

（A2）將SEQ?ID?NO：1所示的氨基酸序列經過氨基酸殘基的取代和/或缺失和/或添加得到的與（A1）所示的蛋白質具有相同功能的蛋白質。

3.?根據權利要求1或2所述的蛋白酶AbTp，其特征在于，所述蛋白酶AbTp來源于放線菌Actinobacteria?bacterium。

4.生物材料，所述生物材料可為下述（B1）-（B4）中的任一種：

（B1）編碼蛋白酶AbTp的DNA分子；

（B2）含有（B1）所述DNA分子的表達盒；

（B3）含有（B1）所述DNA分子的重組載體、或含有（B2）所述表達盒的重組載體；

（B4）含有（B1）所述DNA分子的重組微生物、或含有（B2）所述表達盒的重組微生物、或含有（B3）所述重組載體的重組微生物。

5.根據權利要求4所述的生物材料，其特征在于，（B1）所述DNA分子選自如下（C1）或（C2）：

（C1）核苷酸序列如SEQ?ID?NO:2所示；

（C2）與SEQ?ID?NO：2所示的核苷酸序列具有至少80%、85%、90%、95%或以上同源性且編碼具有相同功能蛋白質的DNA分子。

6.一種水解蝦殼中的蛋白質的方法，其特征在于，所述方法包括將權利要求1-2所述的蛋白酶加入到蝦殼緩沖液進行水解，即可。

7.權利要求1或2所述的蛋白酶、權利要求4或5所述的生物材料在水解蝦殼中的蛋白質的應用。

8.根據權利要求7所述的應用，其特征在于，將蝦殼分散在pH6.0的緩沖液中，加入蛋白酶AbTp，蝦殼和蛋白酶AbTp的質量比為5g：5mg。

9.?根據權利要求7所述的應用，其特征在于，所述的蝦殼為小龍蝦殼，120℃下加熱30分鐘，滅活蝦殼中含有的酶，將烘干后的蝦殼用研磨機研碎。

10.?根據權利要求7所述的應用，其特征在于，5g小龍蝦殼加入pH6.0的緩沖溶液后加入5mg蛋白酶AbTp并定容到100?mL，設置反應溫度為60℃，搖床轉速為200?rpm，反應13?h。