[發明專利]一種海洋雜色曲霉胞外多糖、制備方法及其應用

有效

• 申請號: 202210947634.2
• 申請日: 2022-08-09
• 公開（公告）號: CN115260336B
• 公開（公告）日: 2023-06-09
• 發明（設計）人: 張曉勇;陳祁靜;莫麗;黃日明;陳子慧;王毅卓
• 申請（專利權）人: 華南農業大學
• 主分類號: C08B37/02
• 分類號: C08B37/02;C12P19/04;C12N1/14;A61K31/715;A61P37/02;C12R1/66
• 代理公司: 廣州文智專利代理事務所(特殊普通合伙) 44469
• 代理人: 丁海燕

本發明公開了一種海洋雜色曲霉胞外多糖、制備方法及其應用。從中國南海海域的石珊瑚(Scleractinia)樣品中分離得到海洋雜色曲霉(AspergillusversicolorSCAU141)菌株，并對該菌株進行發酵，得到胞外粗多糖AVP141，并對該胞外粗多糖進行分離純化，得到平均分子量為4082Da的胞外多糖AVP141?A，并對AVP141?A進行結構解析，經鑒定為結構新穎的多糖，經體外免疫活性評估，其對RAW264.7巨噬細胞具有免疫調節作用，并推測AVP141?A是通過影響RAW264.7巨噬細胞的氨基酸代謝，尤其是精氨酸合成和代謝發揮免疫調節作用。

技術領域

本發明涉及海洋多糖技術領域，具體涉及一種海洋雜色曲霉胞外多糖、制備方法及其應用。

背景技術

曲霉(Aspergillus)是最常見且具有重要應用價值的絲狀真菌，在自然界的空氣、土壤、水以及作物上都可以發現其存在，目前已廣泛地應用在傳統釀造業、生物工程研究和現代發酵等。雜色曲霉(A.versicolor)?是世界性廣泛分布種，也是我國最常見的曲霉之一。雜色曲霉作為曲霉屬的一種，能產生多種有用的活性代謝產物，分別具有抗病、抗蟲、抗病毒、抗腫瘤、抗氧化、細胞免疫和抗炎癥等多種生物活性。

到目前為止，有關雜色曲霉的次生代謝產物的的研究較為深入，其主要代謝產物有吲哚類生物堿，如：notoamides類，brevianamides類，?cotteslosins，versicamides類，Cottoquinazolines類，Aspergillines類，蒽醌和氧雜蒽酮類化合物，如：emodin，1-methylemodin，evariquinone，?7-hydroxyemodin,8-methylether，sterigmatocystin，dihydrosterigmatocystin等，香豆素和異香豆素，倍半萜，聚酮以及苯醚等化合物。這些化合物的活性研究表明，它們具有廣泛的藥理活性，如抗腫瘤，抗氧化，抗菌等。

雖然前人對雜色曲霉的次生代謝產物的研究較多，不同海洋微生物產生的胞外多糖在理化性質、單糖組成以及結構上均有不同。可能是因為菌株來源環境、菌株遺傳差異、培養環境以及提取條件有關。即宿主的不同、所處環境不同、培養條件不同都會引起雜色曲霉產生的次生代謝產物的不同，一方面表明雜色曲霉產的代謝物豐富，另一方面也表現了雜色曲霉受環境的影響較大。因此，采用不同的培養基和培養條件進行培養，對不同來源的雜色曲霉的次生代謝產物進行更為系統深入的研究是十分必要的。本發明對采集自中國南海海域(9°39'29.75N，112°59'?09.84E)的石珊瑚(Scleractinia)樣品進行分離，得到海洋雜色曲霉(Aspergillus?versicolor?SCAU141)菌株，并對該菌株進行發酵培養，獲得其胞外多糖AVP141-A，對該胞外多糖進行分離純化，結構解析，體外免疫活性評估，并探討海洋來源雜色曲霉胞外多糖AVP141-A對巨噬細胞免疫調節可能的作用機制。

發明內容

為了解決上述的技術問題，本發明提供了一種海洋雜色曲霉胞外多糖、制備方法及其應用。

本發明的發明人從中國南海海域(9°39'29.75N，112°59'09.84E)?的石珊瑚(Scleractinia)樣品中分離得到海洋雜色曲霉(Aspergillus?versicolorSCAU141)菌株。發明人對采集中國南海海域(9°39'29.75N，?112°59'09.84E)的石珊瑚樣品進行預處理、培養、單菌落分離、選擇單菌落、菌種鑒定和產物鑒定，發現本發明中所得的菌株(其ITS序列在GenBank的登錄號為MF135504)與GenBank上的標準菌株Aspergillus?versicolorATCC?9577(NR?131277)的ITS序列的相似度為99％，并將其命名為Aspergillusversicolor?SCAU141。其分離和鑒定方法為常規方法。

對該菌株進行發酵，篩選其發酵條件，得到胞外粗多糖AVP141。