[發(fā)明專利]解淀粉芽孢桿菌來源的溫度誘導(dǎo)型啟動子及其應(yīng)用

在審

• 申請?zhí)枺?/td>: 202210945725.2
• 申請日: 2022-08-08
• 公開（公告）號: CN116064522A
• 公開（公告）日: 2023-05-05
• 發(fā)明（設(shè)計）人: 羅正山;徐虹;朱逸凡;嚴(yán)一凡;杜姍姍;李莎;王瑞
• 申請（專利權(quán)）人: 南京工業(yè)大學(xué)
• 主分類號: C12N15/113
• 分類號: C12N15/113;C12N15/75;C12N1/21;C12R1/07
• 代理公司: 哈爾濱市陽光惠遠知識產(chǎn)權(quán)代理有限公司 23211
• 代理人: 仇鈺瑩

1.溫度誘導(dǎo)型啟動子，其特征在于，具有如SEQ?ID?NO.1～10任一所示的核苷酸序列。

2.含有權(quán)利要求1所述溫度誘導(dǎo)型啟動子的重組表達載體。

3.含有權(quán)利要求2所述重組表達載體的微生物細胞。

4.根據(jù)權(quán)利要求3所述的微生物細胞，其特征在于，所述微生物細胞為細菌細胞或真菌細胞。

5.根據(jù)權(quán)利要求4所述的微生物細胞，其特征在于，所述細菌包括但不限于：大腸桿菌(Escherichia?coli)、枯草芽孢桿菌(Bacillus?subtilis)或解淀粉芽孢桿菌(Bacillus

amyloliquefaciens)。

6.一種調(diào)控微生物目的蛋白表達量的方法，其特征在于，將編碼目的蛋白的基因連接至權(quán)利要求1所述的溫度誘導(dǎo)型啟動子的下游，將含有所述基因的微生物培養(yǎng)基中培養(yǎng)，并在特定溫度下誘導(dǎo)所述溫度誘導(dǎo)型啟動子起始目的基因的轉(zhuǎn)錄。

7.根據(jù)權(quán)利要求6所述的方法，其特征在于，所述方法是：將編碼目的蛋白的基因連接至SEQ?ID?NO.2所示的啟動子P_gltA下游，將含有所述基因的微生物培養(yǎng)基中培養(yǎng)，并在25～42℃誘導(dǎo)所述溫度誘導(dǎo)型啟動子起始目的基因的轉(zhuǎn)錄。

8.根據(jù)權(quán)利要求6所述的方法，其特征在于，所述方法是：將編碼目的蛋白的基因連接至SEQ?ID?NO.6所示的啟動子P_pgsB或SEQ?ID?NO.7所示的啟動子P_pyk下游，將含有所述基因的微生物培養(yǎng)基中培養(yǎng)，并在25～30℃誘導(dǎo)所述溫度誘導(dǎo)型啟動子起始目的基因的轉(zhuǎn)錄。

9.根據(jù)權(quán)利要求6所述的方法，其特征在于，所述方法是：將編碼目的蛋白的基因連接至SEQ?ID?NO.4所示的啟動子P_citz或SEQ?ID?NO.9所示的啟動子P_pgk下游，將含有所述基因的微生物培養(yǎng)基中培養(yǎng)，并在37～42℃誘導(dǎo)所述溫度誘導(dǎo)型啟動子起始目的基因的轉(zhuǎn)錄。

10.權(quán)利要求1所述的溫度誘導(dǎo)型啟動子，或權(quán)利要求2所述的重組表達載體，或權(quán)利要求3～5任一所述的微生物細胞，或權(quán)利要求6～9任一所述的方法在調(diào)控目的基因表達方面的應(yīng)用。