[發明專利]中國對蝦雌性特異性基因及其檢測引物和應用

在審

• 申請號: 202210933173.3
• 申請日: 2022-08-04
• 公開（公告）號: CN115717168A
• 公開（公告）日: 2023-02-28
• 發明（設計）人: 王瓊;何玉英;任憲云;呂建建;王佳佳;劉萍;李健
• 申請（專利權）人: 中國水產科學研究院黃海水產研究所
• 主分類號: C12Q1/6888
• 分類號: C12Q1/6888;C12Q1/6879;C12Q1/686;C12N15/11
• 代理公司: 青島合創知識產權代理事務所(普通合伙) 37264
• 代理人: 王曉曉

1.中國對蝦雌性特異性基因，其特征在于，其核苷酸序列如SEQ ID No.6所示。

2.中國對蝦雌性特異性引物，其特征在于，用于檢測權利要求1所述的中國對蝦雌性特異性基因，其核苷酸序列為：

Female-specific-F：5’-TGGATGCAGCAGGATTAAGGA-3’；

Female-specific-R：5’-ACACACCCATCTCTAGCAGG-3’。

3.一種用于鑒定中國對蝦遺傳性別的試劑盒，其特征在于，所述試劑盒中包含權利要求2所述的中國對蝦雌性特異性引物。

4.權利要求2所述的中國對蝦雌性特異性引物在鑒定中國對蝦遺傳性別中的應用。

5.一種鑒定中國對蝦遺傳性別的方法，其特征在于，所述方法包括利用權利要求2所述的中國對蝦雌性特異性引物進行檢測的步驟。

6.根據權利要求5所述的方法，其特征在于，所述步驟具體為：提取中國對蝦待測樣本的基因組DNA作為模板，利用權利要求2所述的中國對蝦雌性特異性引物對模板進行PCR擴增；如果擴增產物出現大小分別為378bp和220bp的兩條條帶，則待測樣本為雌性中國對蝦，如果擴增產物僅出現一條大小為378bp的條帶，則待測樣本為雄性中國對蝦。

7.根據權利要求6所述的方法，其特征在于，所述378bp的擴增條帶對應的核苷酸序列如SEQ ID No.5所示；所述220bp的擴增條帶對應的核苷酸序列如SEQ ID No.6所示。

8.根據權利要求6所述的方法，其特征在于，在利用權利要求2所述的中國對蝦雌性特異性引物對模板進行PCR擴增時，同時利用對照引物對模板進行PCR擴增；所述對照引物的核苷酸序列為：

Control-F:5’-AGCGAAGGATAGAGACGAGC-3’；

Control-R:5’-AGGCGAGAGAACAAGAACGA-3’。

9.根據權利要求6所述的方法，其特征在于，所述PCR擴增的反應條件為：94℃預變性5min；94℃變性30s，56℃退火30s，72℃延伸30s，重復35個循環；最后72℃延伸7min，4℃保存。

10.根據權利要求6所述的方法，其特征在于，所述中國對蝦待測樣本為中國對蝦發育早期的幼體、中國對蝦仔蝦、中國對蝦成蝦的活體或凍存樣本。