[發明專利]羅哌卡因的應用、檢測抗生素類藥物濃度的方法、試劑盒及應用

在審

• 申請號: 202210928497.8
• 申請日: 2022-08-03
• 公開（公告）號: CN114994216A
• 公開（公告）日: 2022-09-02
• 發明（設計）人: 章申燕;李寧;劉檬;蔣旭;佟西海
• 申請（專利權）人: 北京華大吉比愛生物技術有限公司
• 主分類號: G01N30/02
• 分類號: G01N30/02;G01N30/72
• 代理公司: 北京維正專利代理有限公司 11508
• 代理人: 張瑞雪

本申請涉及血藥濃度監測的技術領域，更具體涉及羅哌卡因的應用、檢測抗生素類藥物濃度的方法、試劑盒及應用。本申請提供的檢測方法和試劑盒通過了解化合物的性質，選擇利用羅哌卡因來作為內標，用來校準樣品提取、HPLC進樣及色譜分離和檢測中產生的偏差，從而實現準確定量，解決了目前頭孢霉素類藥物、碳青霉烯類、酶抑制劑類、三唑類等化合物內標的缺乏或者同位素內標昂貴的問題，可用于以上化合物的血藥濃度監測。

技術領域

本申請涉及血藥濃度監測的技術領域，更具體地說，涉及羅哌卡因的應用、檢測抗生素類藥物濃度的方法、試劑盒及應用。

背景技術

目前，治療藥物監測（TDM）常用的分析方法主要包括免疫學方法、高效液相色譜法（HPLC）、液相色譜-質譜聯用技術（LC-MS/MS）。其中，TDM傳統的分析技術主要以免疫學方法為主。免疫學方法具有靈敏度高、分析速度快、自動化程度高、操作簡便等優點，適合大批量樣品的測定，但是受藥物抗體種類的限制，絕大多數TDM藥物沒有合適的抗體供應，也不能夠同時測定多種藥物或代謝物。HPLC具有專屬性強、線性范圍比較廣、穩定性相對好，成本低，普及率高等優點，但是HPLC的靈敏度低，樣本前處理分析周期長，有時不能兼顧多種物質同時檢測。而LC-MS/MS具有靈敏度高，特異性強，分析速度快以及高通量等優點，已經成為生物樣本分析定量的金標準。

相關技術中LC-MS/MS在TDM中主要采用同位素內標法和外標法進行定量檢測。然而，利用同位素內標法檢測人血清中的血藥濃度時，需要用到同位素內標化合物，一方面，由于穩定的同位素內標化合物合成代價過高或合成難度太大，難以實現商品化，故絕大多數的血藥濃度監測不存在商品化的同位素內標化合物；另一方面，由于檢測人血清中的血藥濃度時，絕大多數血藥濃度會較高，對于存在商品化的同位素內標化合物，血藥濃度監測過程中同位素內標化合物的使用量會較大，會給血藥濃度監測造成昂貴的成本。外標法定量檢測人血清中的血藥濃度時，檢測前期需要進行樣本凈化，樣本凈化需要利用蛋白沉淀法（PPT）去除血清中的蛋白，然后進行多步稀釋才可進樣檢測；然而，多步稀釋會引入較大的誤差，從而導致對人血清中血藥濃度的定量結果不準，給外標法定量檢測造成了較大的困難。

發明內容

為了提供一種成本低，且可以用于同時檢測多種藥物濃度的檢測方法，本申請提供羅哌卡因的應用、檢測抗生素類藥物濃度的方法、試劑盒及應用。

第一方面，本申請提供羅哌卡因在檢測抗生素類藥物濃度的方法中作為內標化合物的應用。采用如下技術方案：

一種羅哌卡因在檢測抗生素類藥物濃度的方法中作為內標化合物的應用。

優選地，所述檢測抗生素類藥物濃度的方法采用LC-MS/MS進行檢測。

優選地，所述LC-MS/MS的色譜條件為：

色譜柱：Agela Venusil C18，3.0×50mm，粒徑為3μm；

流動相A：含0.1%甲酸的水；

流動相B：含0.1%甲酸的甲醇：乙腈的體積比為1：1；

流速：0.45-0.55mL/min；

進樣體積：4-6μL；

柱溫：35-45℃。

優選地，梯度洗脫程序如下：

優選地，所述抗生素類藥物選自頭孢霉素類藥物、碳青霉烯類、酶抑制劑類和三唑類化合物。

優選地，所述抗生素類藥物包括頭孢霉素類藥物。

優選地，所述羅哌卡因可用于同時檢測頭孢霉素類藥物與選自碳青霉烯類、酶抑制劑類、三唑類化合物中的任意藥物的組合。

優選地，所述羅哌卡因可用于同時檢測頭孢哌酮與選自亞胺培南、西司他丁、美羅培南、伏立康唑、氟康唑中的任意藥物的組合。