[發明專利]一種鑒定白菜苔雜交種“雪銀1573”種子純度的引物及應用

在審

• 申請號: 202210917206.5
• 申請日: 2022-08-01
• 公開（公告）號: CN115927706A
• 公開（公告）日: 2023-04-07
• 發明（設計）人: 陰云飛
• 申請（專利權）人: 武漢川禾農業科技有限公司
• 主分類號: C12Q1/6895
• 分類號: C12Q1/6895;C12Q1/6858;C12N15/11
• 代理公司: 河南豫龍律師事務所 41177
• 代理人: 游國戰

1.一種用于鑒定白菜苔雜交種“雪銀1573”種子純度的一對SSR引物，其特征在于，所述引物核苷酸序列如序列表SEQ?ID?No.1～2所示。

2.一種采用權利要求1所述的SSR引物鑒定白菜苔雜交種“雪銀1573”種子純度的方法，其特征在于包括以下步驟：

(1)提取白菜苔雜交種“雪銀1573”及親本基因組DNA；

(2)以上述的樣品的基因組DNA為模版，采用如序列表SEQ?ID?No.1～2所示引物進行PCR擴增，采用的反應體系為：10μL體系，包括：2×Taq?DNA聚合酶Mix?5μL，上游和下游引物10μ?mol/L各0.5μL，供試白菜苔雜交種基因組DNA模板(50ng/μL)1μL，雙蒸水補足10μL；

采用的擴增程序為：94℃預變性4min，35個擴增循環(94℃45sec，55℃30sec，72℃45sec)；72℃延伸5min，4℃保存；

(3)PCR擴增產物鑒定：將上述的擴增獲得的產物經10％聚丙烯酰胺凝膠電泳分離，銀染法染色，待測樣品PCR擴增產物的電泳條帶同時含有父本材料擴增產物的條帶和母本材料擴增產物的條帶，為白菜苔雜交種“雪銀1573”種子；

(4)種子純度計算，統計上述銀染的結果：所鑒定的白菜苔雜交種“雪銀1573”的種子純度(％)＝(總鑒定種子粒數-非雜交種數-外來雜種數)/總鑒定種子粒數×100％。

3.權利要求2所述的鑒定方法在用于快速鑒定白菜苔雜交種“雪銀1573”種子純度方面的應用。