[發(fā)明專利]一種Angelman綜合癥致病基因UBE3A突變位點(diǎn)的應(yīng)用及其診斷試劑

在審

• 申請(qǐng)?zhí)枺?/td>: 202210914145.7
• 申請(qǐng)日: 2022-08-01
• 公開(kāi)（公告）號(hào): CN116004788A
• 公開(kāi)（公告）日: 2023-04-25
• 發(fā)明（設(shè)計(jì)）人: 曾橋;劉鑫林;薛斌
• 申請(qǐng)（專利權(quán)）人: 湖南家輝生物技術(shù)有限公司
• 主分類號(hào): C12Q1/6883
• 分類號(hào): C12Q1/6883;C12N15/11
• 代理公司: 北京高沃律師事務(wù)所 11569
• 代理人: 薛紅凡

本發(fā)明提供了一種Angelman綜合癥致病基因UBE3A突變位點(diǎn)的應(yīng)用及其診斷試劑，屬于基因診斷技術(shù)領(lǐng)域。本發(fā)明首次證實(shí)UBE3A基因突變位點(diǎn):NM_000462:exon7:c.469TC:p.F157L和UBE3A:NM_000462.4:exon7:c.556dupG:p.E186Gfs*5導(dǎo)致Angelman綜合征發(fā)病。該突變位點(diǎn)在制備Angelman綜合征診斷試劑或制備防治Angelman綜合征的藥物中的應(yīng)用。針對(duì)該突變位點(diǎn)的檢測(cè)試劑用于快速有效預(yù)測(cè)或診斷Angelman綜合征，為Angelman綜合征的發(fā)病機(jī)制研究奠定了重要基礎(chǔ)，也為治療Angelman綜合征提供可能的藥物靶點(diǎn)。

技術(shù)領(lǐng)域

本發(fā)明屬于基因診斷技術(shù)領(lǐng)域，具體涉及一種Angelman綜合癥致病基因UBE3A突變位點(diǎn)的應(yīng)用及其診斷試劑。

背景技術(shù)

Angelman綜合征(angelman?syndrome，AS)(MIM?105830)又稱快樂(lè)木偶綜合征，是一種遺傳異常所致的神經(jīng)發(fā)育障礙性疾病，屬于非進(jìn)展性腦病。特征性表現(xiàn)為智力低下、快樂(lè)行為、嚴(yán)重語(yǔ)言障礙、共濟(jì)失調(diào)、睡眠障礙及癲癇發(fā)作等。發(fā)病率約為1/20000-1/12000。

Angelman綜合征主要臨床特征為：

1)典型表現(xiàn)(100％)：嚴(yán)重生長(zhǎng)發(fā)育遲緩；語(yǔ)言障礙，無(wú)或僅能說(shuō)少量詞語(yǔ)接受非言語(yǔ)交往的能力較言語(yǔ)交往的能力高；活動(dòng)或平衡障礙，通常步態(tài)不穩(wěn)或四肢震顫；頻繁大笑，明顯的興奮動(dòng)作；易激惹，常伴有手撲翼樣運(yùn)動(dòng)；多動(dòng)，注意力僅能短暫集中。

2)常見(jiàn)表現(xiàn)(≥80％)：頭圍生長(zhǎng)延遲，不對(duì)稱通常導(dǎo)致小頭畸形；癲癇發(fā)作，通常3歲前開(kāi)始，伴有大量慢性棘波和三相波。

3)相關(guān)表現(xiàn)(20％-80％)：枕部扁平，枕溝；喜歡吐舌，吮吸或吞咽障礙，嬰兒期喂養(yǎng)困難；突頜，大口牙間隙寬，頻繁流延，過(guò)度咀嚼；皮膚色素減少，與家人相比頭發(fā)和顏色顏色淺(僅見(jiàn)于缺失的病例)；下肢過(guò)度活動(dòng)，腱反射亢進(jìn)；舉上肢時(shí)屈肘，尤其是在行走時(shí)；熱敏感增強(qiáng)，睡眠紊亂，對(duì)水感興趣。

主要由基因缺陷引起，源于15q11-q13?UBE3A基因(MIM?601623)表達(dá)異常或功能缺陷，本病由母系單基因遺傳缺陷所致，如來(lái)自母親的第15號(hào)染色體印跡基因區(qū)15q部分缺陷，或同時(shí)擁有兩條來(lái)自父親的帶有此缺陷的第15號(hào)染色體。

Angelman綜合征的遺傳學(xué)發(fā)病機(jī)制類型有：

Ⅰ型(缺失型)：母源15號(hào)染色體q11.2-13區(qū)域約5-7Mb缺失，約占68％。

Ⅱ型(UPD型)：q11.2-13區(qū)域父源單親二倍體(uniparental?disomy，UPD)所致，即患者的兩條15號(hào)染色體或15號(hào)染色體q11.2-13片段均來(lái)自父親，約占7％。

Ⅲ型(ID型)：印跡缺陷(imprinting?defects)所致，患者雖然從雙親各遺傳了1條15號(hào)染色體，但母源15號(hào)染色體q11.2-13區(qū)域內(nèi)的印跡中心(imprinting?center)呈現(xiàn)DNA甲基化異常或基因表達(dá)缺失，通常為6-200kb微缺失，約占3％。

Ⅳ型(UBE3A突變型)：UBE3A基因突變所致，基因內(nèi)大片段缺失/重復(fù)或整個(gè)基因缺失/重復(fù)突變罕見(jiàn)，通常表現(xiàn)為UBE3A基因點(diǎn)突變或小的插入缺失，約占11％。

另有10％的患者遺傳機(jī)制不明確。

根據(jù)不同的遺傳學(xué)異常，可采用不同的遺傳學(xué)檢測(cè)方法，包括FISH、array?CGH、SNP?array、甲基化PCR和測(cè)序等方法。對(duì)于UBE3A突變型最常用的間的方法是測(cè)序法。