[發(fā)明專利]一種與甜瓜單果重性狀主效QTL-sfw2.2緊密連鎖的分子標(biāo)記及其應(yīng)用在審
| 申請(qǐng)?zhí)枺?/td> | 202210906516.7 | 申請(qǐng)日： | 2022-07-29 |
| 公開（公告）號(hào)： | CN115961068A | 公開（公告）日： | 2023-04-14 |
| 發(fā)明（設(shè)計(jì)）人： | 紀(jì)鵬;張帆;盛云燕;戴冬洋;薩日娜;王嶺 | 申請(qǐng)（專利權(quán)）人： | 黑龍江八一農(nóng)墾大學(xué) |
| 主分類號(hào)： | C12Q1/6895 | 分類號(hào)： | C12Q1/6895;C12N15/11 |
| 代理公司： | 哈爾濱龍科專利代理有限公司 23206 | 代理人： | 王新雨 |
| 地址： | 163316 黑*** | 國(guó)省代碼： | 黑龍江;23 |
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| 摘要： | |||
| 搜索關(guān)鍵詞： | 一種 甜瓜 單果重 性狀 qtl sfw2 緊密 連鎖 分子 標(biāo)記 及其 應(yīng)用 | ||
1.一種與甜瓜單果重性狀主效QTL-sfw2.2緊密連鎖的分子標(biāo)記，其特征在于：其引物序列為：
BCYIndel13F：TGCTTTTCTAAAGACCCTTAGTACA，
BCYIndel13R：ATCCCTATCCACCACTACATTTACT。
2.一種權(quán)利要求1所述的分子標(biāo)記BCYIndel13的應(yīng)用，其特征在于：所述分子標(biāo)記BCYIndel13用于甜瓜苗期分子標(biāo)記輔助育種。
3.根據(jù)權(quán)利要求2所述的分子標(biāo)記BCYIndel13的應(yīng)用，其特征在于：所述應(yīng)用為：將該分子標(biāo)記在若干個(gè)甜瓜自然群體中進(jìn)行單果重性狀檢測(cè)，用待選材料DNA為模板，分子標(biāo)記BCYIndel13的引物對(duì)其進(jìn)行PCR擴(kuò)增，將擴(kuò)增產(chǎn)物進(jìn)行聚丙烯酰胺凝膠電泳并結(jié)合田間性狀分析。
4.根據(jù)權(quán)利要求3所述的分子標(biāo)記BCYIndel13的應(yīng)用，其特征在于：所述分子標(biāo)記方法為：
(1)以待鑒定材料DNA為模板，分子標(biāo)記BCYIndel13的引物對(duì)其進(jìn)行PCR擴(kuò)增；PCR產(chǎn)物檢測(cè)：反應(yīng)產(chǎn)物在7％的非變性聚丙烯酰胺凝膠上電泳，用硝酸銀染色；
(2)標(biāo)記引物鑒定：重果型品種能擴(kuò)增出287bp特異條帶，中間型品種擴(kuò)增出287bp和306bp雜合條帶，輕果型品種擴(kuò)增出306bp條帶。
5.根據(jù)權(quán)利要求4所述的分子標(biāo)記BCYIndel13的應(yīng)用，其特征在于：步驟(1)中，PCR擴(kuò)增體系為10μL：包括上游引物1μL、下游引物1μL、Taq?Master?Mix酶3μL、DNA模板1μL、ddH2O4μL。
6.根據(jù)權(quán)利要求4所述的分子標(biāo)記BCYIndel13的應(yīng)用，其特征在于：步驟(1)中，PCR擴(kuò)增程序：在95℃下預(yù)變性5min，在95℃變性30s，在55℃退火30s，在72℃延伸45s，第2步到第4步35個(gè)循環(huán)，72℃延伸10min，4℃保存。
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