[發明專利]一種測定水樣中土霉素的熒光分析方法

在審

• 申請號: 202210887584.3
• 申請日: 2022-07-26
• 公開（公告）號: CN115015209A
• 公開（公告）日: 2022-09-06
• 發明（設計）人: 王治科;陳致杭;王雪源;陳凌云;王全坤;葉存玲;范順利
• 申請（專利權）人: 河南師范大學
• 主分類號: G01N21/64
• 分類號: G01N21/64
• 代理公司: 新鄉市平原智匯知識產權代理事務所(普通合伙) 41139
• 代理人: 路寬

本發明公開了一種檢測水樣中土霉素的熒光分析方法，具體包括硫量子點的制備：在室溫條件下依次將4.80mL、0.10mol/L的硫代乙酰胺、8.50mL H₂O和3.00mL PEG?400加入到反應容器中并攪拌混合均勻，再滴加3.70mL、3wt%的雙氧水進行充分混合，隨后于130°C攪拌反應4.5h制得硫量子點；標準曲線的繪制以及待測水樣中土霉素的測定等步驟。本發明基于土霉素的高選擇性熒光猝滅作用，提出了一個簡單、低成本、高靈敏度的土霉素熒光測定體系，并成功應用于水樣中土霉素的測定。

技術領域

本發明屬于熒光檢測技術領域，具體涉及一種測定水樣中土霉素的熒光分析方法。

背景技術

土霉素具有抗菌活性高、成本低和副作用小等優點，廣泛應用在水產養殖業，在水樣中檢出率高，對環境和人類健康造成潛在危害，需要準確測定水樣中殘留土霉素含量。土霉素檢測方法有高效液相色譜法、液相色譜-質譜聯用法和毛細管電泳法等，這些方法所用設備昂貴、技術要求高以及需要進行繁瑣的樣品前處理。因此，開發簡單、低成本、靈敏度高的土霉素快速檢測新方法具有重要意義。靈敏度高、儀器設備較便宜的熒光分析法為開發快速測定土霉素提供了可能。硫量子點為不含重金屬元素量子點，具有細胞毒性低、生物相容性良好、水分散性、光穩定性優異等特征，因此在離子及小分子分析、細胞成像等方面引起了人們的關注與研究興趣。

發明內容

本發明解決的技術問題是提供了一種測定水樣中土霉素的熒光分析方法，本發明以硫代乙酰胺(Thioacetamide，TAA)為硫源，PEG-400為保護劑，采用自下而上方法一步合成硫量子點，該硫量子點具有高選擇性識別土霉素的獨特特征。本發明提供的硫量子點熒光探針測定體系，對水樣中土霉素識別選擇性強且靈敏度高。

本發明為解決上述技術問題采用如下技術方案，一種測定水樣中土霉素的熒光分析方法，其特征在于具體步驟為：

步驟S1：硫量子點的合成，在室溫條件下依次將4.80mL、0.10mol/L的硫代乙酰胺、8.50mL H₂O和3.00mL PEG-400加入到反應容器中并攪拌混合均勻，再滴加3.70mL、3wt％的雙氧水進行充分混合，隨后于130℃攪拌反應4.5h制得硫量子點，記為SQDS@PEG-400；

步驟S2：標準曲線的繪制，將1.00mL步驟S1得到的硫量子點與0.50mL、pH＝7.0的BR緩沖溶液混合，再分別加入不同梯度濃度的土霉素溶液，定容4.00mL，混勻，于25℃反應30min，在λ_ex＝340nm下，分別測定空白溶液和土霉素存在時的熒光強度F₀和F，計算△F＝F₀–F，土霉素濃度在0-40μM范圍內，△F與土霉素濃度之間呈現良好的線性關系，線性方程為：△F＝8.5122C+3.0375，R²＝0.9904，檢出限為1.27μM；

步驟S3：水樣中土霉素的檢測，將1.00mL步驟S1得到的硫量子點與0.50mL、pH＝7.0的BR緩沖溶液混合，再加入待測水樣后定容至4.00mL，混勻，于25℃反應30min，在λ_ex＝340nm下，進行熒光強度的測定，根據測定的熒光強度并結合步驟S2得到的線性方程完成對待測水樣中土霉素的測定。

本發明與現有技術相比具有以下優點和有益效果：本發明基于土霉素的高選擇性熒光猝滅作用，提出了一個簡單、低成本、高靈敏度的土霉素熒光測定體系，并成功應用于水樣中土霉素的測定。

附圖說明

圖1是不同原料合成硫量子點的可行性分析圖；

圖2是硫量子點的激發光譜與發射光譜圖；

圖3是pH對硫量子點穩定性的影響曲線；

圖4是離子強度對硫量子點穩定性的影響曲線；

圖5是繪制的標準曲線；