[發(fā)明專利]一種工業(yè)大麻無(wú)菌實(shí)生苗繁育方法

有效

• 申請(qǐng)?zhí)枺?/td>: 202210884476.0
• 申請(qǐng)日: 2022-07-25
• 公開(kāi)（公告）號(hào): CN115152352B
• 公開(kāi)（公告）日: 2023-04-25
• 發(fā)明（設(shè)計(jì)）人: 楊柳;高嬙;金勛;潘紅麗;李娜;芮海英;李澤宇;郭麗;王迪;馮鵬;韓墨;齊國(guó)超;金鈴;韓冰;車野;師臣;任翠梅;趙踐韜;李冬梅;劉冰
• 申請(qǐng)（專利權(quán)）人: 黑龍江省農(nóng)業(yè)科學(xué)院大慶分院
• 主分類號(hào): A01C1/00
• 分類號(hào): A01C1/00;A01C1/08;A01G31/00
• 代理公司: 哈爾濱華夏松花江知識(shí)產(chǎn)權(quán)代理有限公司 23213
• 代理人: 侯靜

一種工業(yè)大麻無(wú)菌實(shí)生苗繁育方法，涉及一種工業(yè)大麻繁育方法。為了解決現(xiàn)有的種子滅菌方法滅菌率低、對(duì)種子傷害大的問(wèn)題。方法：種子精選，用清水浸泡直至種子頂破種皮露出白色胚根后剝?nèi)ネ夥N皮和內(nèi)種皮，放入裝有質(zhì)量分?jǐn)?shù)為0.2％的次氯酸鈉的三角瓶中進(jìn)行滅菌處理，培養(yǎng)皿培養(yǎng)得到無(wú)菌的發(fā)芽種子，轉(zhuǎn)移到裝有MS固體培養(yǎng)基的容器中繼續(xù)培養(yǎng)得到無(wú)菌實(shí)生苗，最后進(jìn)行移栽。本發(fā)明種子先浸泡種子至胚根頂破種皮后去除外種皮和內(nèi)種皮，只將完全展開(kāi)、裸露的子葉以及胚軸、胚根進(jìn)行滅菌，低濃度的次氯酸鈉對(duì)種子發(fā)芽基本無(wú)傷害，種子發(fā)芽率100％，長(zhǎng)勢(shì)好，滅菌率達(dá)到90?100％。

技術(shù)領(lǐng)域

本發(fā)明涉及一種工業(yè)大麻繁育方法。

背景技術(shù)

大麻(Cannabis?sativa?L.)是大麻科(Cannabinaceae)大麻屬(Cannabis)1年生草本植物，分為工業(yè)大麻和毒品大麻，現(xiàn)在國(guó)內(nèi)外廣泛應(yīng)用的大麻為工業(yè)大麻。工業(yè)大麻是指四氫大麻酚含量低于0.3％的大麻，我國(guó)將工業(yè)大麻稱為漢麻(hemp)。大麻渾身是寶，主要應(yīng)用于農(nóng)業(yè)種植、紡織、服裝、造紙、軍需、化工、新型建材、生物能源、食品保健、醫(yī)藥和飼料等方面。

我國(guó)工業(yè)大麻產(chǎn)業(yè)發(fā)展勢(shì)頭很猛，但由于大麻屬雌雄異株，為典型的異花授粉作物,在大麻的繁種過(guò)程中，由于生物學(xué)混雜、機(jī)械混雜和不良環(huán)境條件引起的品種混雜退化現(xiàn)象十分普遍，品種間極易串粉雜交，核心種質(zhì)資源的防雜保純和雄性大麻植株繁殖十分困難。要解決工業(yè)大麻種質(zhì)資源提純保存，具有優(yōu)良種質(zhì)特性的后代材料快速純化擴(kuò)繁，就需要解決工業(yè)大麻無(wú)性繁殖技術(shù)問(wèn)題，在大麻離體培養(yǎng)過(guò)程中，無(wú)菌實(shí)生苗和外植體的獲得是關(guān)鍵，選擇適宜的種子滅菌方法(消毒劑和處理時(shí)間)，既有良好的除菌效果，大大降低了初始污染率，又獲得了生長(zhǎng)狀態(tài)更好的實(shí)生苗。目前種子的滅菌方法集中在用75％酒精、高濃度的次氯酸鈉或升汞三種消毒劑組合應(yīng)用對(duì)種子進(jìn)行直接滅菌，然后再浸泡剝?nèi)シN皮或不浸泡不剝?nèi)シN皮直接種植于培養(yǎng)基中，但由于大麻種皮厚并且內(nèi)生菌很多，這些方法滅菌率較低，并對(duì)種子傷害很大，發(fā)芽率較低。

發(fā)明內(nèi)容

本發(fā)明為了解決現(xiàn)有的種子滅菌方法滅菌率低、對(duì)種子傷害大的問(wèn)題，提出一種工業(yè)大麻無(wú)菌實(shí)生苗繁育方法。

本發(fā)明工業(yè)大麻無(wú)菌實(shí)生苗繁育方法按照以下步驟進(jìn)行：

一、種子精選

挑選成熟、完整飽滿、無(wú)病蟲(chóng)侵害、有光澤的工業(yè)大麻種子，種子凈度達(dá)到100％，純度達(dá)到100％，發(fā)芽率達(dá)到99％以上；

二、種子浸泡

用清水浸泡直至種子頂破種皮露出白色胚根后剝?nèi)ネ夥N皮和內(nèi)種皮；種子浸泡時(shí)間一般為24-48小時(shí)，根據(jù)環(huán)境溫度適當(dāng)調(diào)整；

三、種子滅菌

將剝?nèi)ネ夥N皮和內(nèi)種皮的工業(yè)大麻種子放入裝有質(zhì)量分?jǐn)?shù)為0.2％的次氯酸鈉的三角瓶中進(jìn)行滅菌處理，滅菌時(shí)間總計(jì)30～35分鐘；滅菌分3次處理，每隔10-12分鐘更換1次新的次氯酸鈉，滅菌處理過(guò)程中搖動(dòng)三角瓶以達(dá)到滅菌徹底的效果；滅菌處理后用無(wú)菌水沖洗種子3-4遍，將發(fā)芽種子表面的次氯酸鈉沖洗干凈；

四、培養(yǎng)皿培養(yǎng)

將MS固體培養(yǎng)基滅菌后分裝入培養(yǎng)皿中，待培養(yǎng)基凝固冷卻后將滅菌完成的種子接種到皿中，培養(yǎng)皿用報(bào)紙包裹后，放于培養(yǎng)箱中進(jìn)行培養(yǎng)，培養(yǎng)2-3天，得到無(wú)菌的發(fā)芽種子；

五、繁殖

將無(wú)菌的發(fā)芽種子轉(zhuǎn)移到裝有MS固體培養(yǎng)基的容器中繼續(xù)培養(yǎng)，發(fā)芽種子播種密度和容器體積以不影響工業(yè)大麻植株生長(zhǎng)為宜，培養(yǎng)10-15天，得到無(wú)菌實(shí)生苗；獲得的無(wú)菌實(shí)生苗根系強(qiáng)壯，生長(zhǎng)良好，不需馴化煉苗，可直接出瓶，用做組織培養(yǎng)中的無(wú)菌外植體來(lái)源，用于工業(yè)大麻組織培養(yǎng)、遺傳轉(zhuǎn)化以及工廠化育苗等。

六、移栽

將無(wú)菌實(shí)生苗直接移栽，或?qū)o(wú)菌實(shí)生苗擴(kuò)繁生根后進(jìn)行移栽。