[發明專利]一種參仙升脈口服液超高效液相檢測方法

有效

• 申請號: 202210879150.9
• 申請日: 2022-07-25
• 公開（公告）號: CN115266976B
• 公開（公告）日: 2023-05-16
• 發明（設計）人: 李曄;劉峰;劉洋;宗時宇;張紅;孫婷婷;王春柳;龍凱花
• 申請（專利權）人: 山東步長制藥股份有限公司
• 主分類號: G01N30/02
• 分類號: G01N30/02;G01N30/72
• 代理公司: 西安佩騰特知識產權代理事務所(普通合伙) 61226
• 代理人: 曹宇飛

1.一種參仙升脈口服液超高效液相檢測方法，其特征在于，所述檢測方法包括以下步驟：

⑴、對照品溶液的制備：稱取蘆丁、補骨脂苷、異補骨脂苷、補骨脂酚、補骨脂素、異補骨脂素對照品，分別置于量瓶中，加甲醇溶解并定容，作為對照品貯備液；再用甲醇將各對照品貯備液稀釋至0.5～2ug/ml，即得；

⑵、供試品溶液的制備：取參仙升脈口服液，用甲醇稀釋至刻度，搖勻，濾過，即得；

⑶、色譜檢測條件為：色譜柱：十八烷基硅烷鍵合硅膠為填充劑，流動相采用甲醇(A)和0.07～0.12％甲酸水(B)梯度洗脫，洗脫程序為0～13min，5％～60％A；13～27min，60％～95％A；27～30min，95％A，流速0.1～0.5mL·min^-1，進樣量1～3μL，柱溫25～35℃；

⑷、質譜條件為：離子源為加熱電噴霧離子源(H-ESI)，噴霧電壓為3～5kV，鞘氣(N2)流量30～50arb，輔助氣流量8～12arb，輔助加熱器溫度330～370℃，毛細管溫度310～330℃，S-lens射頻水平45～55，自動增益控制(AGC)100～110，掃描方式采用正、負離子Full?MS/dd-MS2模式，Full?MS分辨率60000～80000，dd-MS2分辨率30000～40000；掃描范圍m/z100～2000，碰撞能量20～8eV；

⑸、數據處理：根據質譜精確相對分子量信息，選擇一級準分子離子峰質荷比實測值與理論值誤差小于5ppm的分子，與參仙升脈口服液化學成分數據庫信息進行匹配，初步推測化合物信息，采用Xcalibur?2.0軟件進一步對目標化合物色譜峰及其二級碎片離子信息進行提取，并結合相關化學成分數據庫和文獻信息對目標化合物進行鑒定和確證。

2.如權利要求1所述檢測方法，其特征在于，所述檢測方法步驟⑴對照品溶液的制備中對照品溶液的濃度為1ug/ml。

3.如權利要求1所述檢測方法，其特征在于，所述檢測方法步驟⑵供試品溶液的制備中，所述甲醇稀釋的倍數8～12倍。

4.如權利要求1所述檢測方法，其特征在于，所述檢測方法步驟⑶色譜檢測條件為：所述色譜柱的型號為：Thermo?Accucore?aQ。

5.如權利要求1所述檢測方法，其特征在于，所述檢測方法步驟⑶色譜檢測條件為：流動相采用甲醇(A)和0.1％甲酸水(B)梯度洗脫，洗脫程序為0～13min，5％～60％A；13～27min，60％～95％A；27～30min，95％A，流速0.3mL·min^-1；進樣量2μL，柱溫30℃。

6.如權利要求1所述檢測方法，其特征在于，所述檢測方法步驟⑷質譜條件為：噴霧電壓為3.5kV，鞘氣(N2)流量40arb，輔助氣流量10arb，輔助加熱器溫度350℃，毛細管溫度320℃，S-lens射頻水平50，自動增益控制(AGC)106，掃描方式采用正、負離子Full?MS/dd-MS2模式，Full?MS分辨率70000，dd-MS2分辨率35?000；掃描范圍m/z?120～1?800，碰撞能量30eV、50eV、70eV。